水牛角含巯基类成分解热效应评价研究

摘要

目的 制备水牛角含巯基类成分（-SH active fractions, SHF）,评价其解热效应。方法 通过十二烷基硫酸钠-二硫苏糖醇（SDS-DTT）联合提取法制备水牛角SHF,并采用Ellman法测定游离巯基（-SH）浓度；基于nano LC-MS/MS分析表征水牛角SHF物质组成。采用脂多糖（LPS）建立大鼠发热模型评价水牛角SHF解热活性，采用酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒测定血浆中前列腺素E₂（PGE₂）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平，测定下丘脑环磷酸腺苷（cAMP）、PGE₂、TNF-α的水平；采用非靶向代谢组学的方法，探究水牛角SHF对发热大鼠血浆代谢物干预情况。结果 SDS-DTT联合提取法可有效制备水牛角SHF,其中主要成分为含丰富半胱氨酸残基（Cysteine, Cys）的Ⅰ型、Ⅱ型角蛋白、角蛋白相关蛋白等，SHF的-SH占蛋白质比例较水牛角水提液提高了约20倍。发热大鼠给予水牛角SHF 0.5 h后大鼠体温显著下降（P<0.01）,且解热效应持续4.5 h;同时显著降低血浆及下丘脑PGE₂、IL-1β、TNF-α、cAMP等水平。从空白组与模型组血浆样本中共鉴定出137个潜在差异代谢物，水牛角SHF可回调其中31个代谢物，包括溶血磷脂酸、磷脂酰肌醇、磷脂酸、甘油三酯、磷脂酰胆碱等，主要涉及甘油磷脂代谢通路。结论 水牛角SHF解热效应确切，给药剂量为水提液的1/10即可显示与其相当的解热效应，为水牛角清热功效物质基础研究提供了方向和依据。

关键词

水牛角 / 含巯基类 / 解热 / 抗炎 / 非靶向代谢组