温经活血外治法通过抑制NGF/TrKA信号通路改善膝骨关节炎外周痛敏的机制研究

摘要

目的 基于NGF/TrKA信号通路探讨温经活血外治法减轻膝骨关节炎(Knee osteoarthritis, KOA)外周痛敏的效应及机制。方法 30只SD大鼠随机分为正常组、KOA组和易层组，通过前交叉韧带切断术(ACLT)进行KOA造模，造模后14 d,易层组大鼠予以易层贴敷治疗。不同时间点测定大鼠外周痛敏阈值，对大鼠软骨切片进行HE、Aggrecan、Ⅱ型胶原染色；滑膜切片进行HE、天狼星红、镀银染色及免疫染色；Western blot法测定滑膜及复合体经神经末梢逆转运至背根神经节(Dorsal root ganglia, DRG)组织中NGF/TrKA信号通路的关键分子NGF、TrKA,炎症指标IL-1β,疼痛介质TRPV1,泛神经标记物PGP9.5、S100等蛋白表达，qPCR测定相应基因表达，ELISA法测定大鼠外周血中NGF、SP含量。结果 与KOA组相比较，易层组大鼠冷痛敏和机械痛敏阈值增加(P<0.05,P<0.01);滑膜组织中NGF、TrKA、TRPV1、IL-1β、PGP9.5等蛋白和基因表达下降(P<0.05,P<0.01);DRG组织中TRPV1、PGP9.5、S100等蛋白和基因表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论 温经活血外治法可抑制NGF/TrKA信号通路，下调NGF、TrKA、TRPV1、IL-1β、PGP9.5的基因和蛋白表达，并可能抑制感觉神经纤维萌发，改善大鼠KOA外周痛敏状态。

关键词

膝骨关节炎 / 滑膜炎症 / 温经活血外治法 / 外周痛敏 / 神经生长因子