基于UPLC-Q-TOF/MS整合网络药理学探讨平肝益肾方治疗自发性高血压大鼠靶器官损害的效应机制

摘要

目的 探究平肝益肾方治疗自发性高血压大鼠靶器官损害的效应机制。方法 使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）测定平肝益肾方的化学成分，结合网络药理学方法对平肝益肾方的化学成分进行靶标分析、功能富集，预测平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的潜在作用机制。将自发性高血压大鼠随机分为模型组、平肝益肾方低剂量组(2 g·kg^-1)、平肝益肾方高剂量组(5 g·kg^-1)和缬沙坦组(7.2 mg·kg^-1),每组6只。Wistar-Kyoto大鼠作为对照组，对照组和模型组大鼠灌胃生理盐水，连续灌胃8周。采用HE和Masson染色，观察大鼠心脏和胸主动脉的病理学损伤和纤维化程度。采用免疫组织化学染色和Western blot检测大鼠心脏、肝脏和肾脏中EGFR的表达水平。采用免疫荧光染色检测大鼠心脏、肝脏和肾脏中EGFR和EEA1共定位情况。结果 通过UPLC-Q-TOF/MS检测出平肝益肾方中的26种化学成分。网络药理学揭示EGFR、PIK3R1和EP300等可能是平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的关键治疗靶点，平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害可能与EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性、血脂与动脉粥样硬化和HIF-1信号通路等密切相关。平肝益肾方高剂量组可显著降低大鼠的收缩压和平均动脉压（P<0.05,P<0.01）,减轻心脏和胸主动脉的病理学损伤和纤维化程度（P<0.01,P<0.001）,显著降低大鼠肝脏和肾脏中EGFR的表达水平（P<0.01）,改善肝脏与肾脏的纤维化，显著降低肾脏中EGFR和EEA1的共定位水平（P<0.001）,调节EGFR在早期内体的堆积，改善肾脏的纤维化。结论 整合UPLC-Q-TOF/MS、网络药理学和自发性高血压大鼠模型初步探索平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的效应机制，为平肝益肾方治疗高血压进一步的机制研究和临床应用提供科学依据。

关键词

平肝益肾方 / 高血压 / 靶器官损害 / UPLC-Q-TOF/MS / 网络药理学