长春胺衍生物Vin24通过Bcl-2/Bax/Caspase3通路改善糖尿病小鼠周围神经病变研究

摘要

目的 探讨长春胺衍生物Vin24对糖尿病周围神经病变（DPN）小鼠病理症状的保护作用及其作用机制。方法 40只8周龄雄性C57BL/6N小鼠随机分为对照组、模型组、长春胺给药组和Vin24给药组。除对照组外，其余3组小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,150 mg·kg^-1)诱导1型糖尿病模型，6周后开始给药。30只18周龄雄性db/db小鼠随机分为模型组、长春胺给药组和Vin24给药组，10只同窝阴性小鼠作为对照组。给药组每天灌胃长春胺(30 mg·kg^-1)或Vin24(46.8 mg·kg^-1),对照组和模型组每天灌胃等体积的生理盐水，持续4周。通过检测机械异位痛觉和热痛觉阈值来评价小鼠感觉功能。利用激光散斑成像仪检测小鼠外周血流量。取足垫表皮组织进行PGP9.5免疫荧光染色评价表皮内神经纤维（IENF）密度；提取原代背根底神经节（DRG）神经元进行β-tubulinⅢ免疫荧光染色评价DRG神经元突起生长情况。此外，取DRG组织进行ATF3免疫荧光染色以及Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase3和Caspase3的蛋白水平来评价DRG神经元凋亡水平。结果 与模型组相比，Vin24给药组小鼠的机械异位痛和热痛觉阈值降低（P<0.01,P<0.001）,外周血流量增加（P<0.001）;IENF密度增加（P<0.05,P<0.01）,DRG神经元突起生长得到改善（P<0.001）。荧光染色结果显示，Vin24给药后小鼠DRG组织中神经元凋亡标记物ATF3的表达减少（P<0.01,P<0.001）。Western blot结果显示，抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白水平显著增加（P<0.05）,促凋亡蛋白Bax和Cleaved-Caspase3的蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论 长春胺衍生物Vin24通过调控Bcl-2/Bax/Caspase3通路，抑制Cleaved-Caspase3的激活，降低神经元的凋亡水平，从而减轻DRG神经元损伤，改善糖尿病小鼠周围神经病变。

关键词

糖尿病周围神经病变 / 背根底神经节 / 神经元凋亡 / Bcl-2/Bax/Caspase3通路 / 长春胺衍生物