基于Caspase11-GSDMD-GSDMD-N通路探讨清瘟败毒饮对脓毒症小鼠肺损伤作用机制

摘要

目的 探究清瘟败毒饮治疗脓毒症诱导的肺损伤的作用机制。方法 100只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、清瘟败毒饮低剂量组、清瘟败毒饮中剂量组、清瘟败毒饮高剂量组，每组20只。用HE染色检查肺组织的病理情况，ELISA法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、趋化因子配体10(CXCL10)及血浆凝血因子Ⅲ(F3)的表达水平，qPCR检测肺组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、环氧化酶-2(COX-2)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA表达水平，血常规分析仪分析血浆中血小板(PLT)数量，免疫荧光分析法检测肺泡组织毛细血管内皮细胞的血管内皮钙黏素(VE-cadherin)、内皮黏附物连接标记物闭合蛋白5(CLDN5)以及周细胞标记物神经元胶原抗原2(NG2), Western blot检测小鼠肺组织中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶11(Caspase 11)、GSDMD、GSDMD-N的蛋白表达水平。结果 与空白组相比，模型组小鼠肺组织呈现明显病理损伤变化，血清IL-1β、TNF-α、CXCL10水平和肺组织MCP-1、COX-2、IFN-γ mRNA表达水平明显增高(P<0.01),血浆中PLT数量和F3含量明显降低(P<0.01);肺组织中VE-cadherin、CLDN5、NG2蛋白荧光表达明显增强(P<0.01),Caspase 11、GSDMD-N蛋白表达升高(P<0.01);与模型组相比，清瘟败毒饮各剂量组小鼠肺组织病理损伤均减轻，血清中IL-1β、TNF-α、CXCL10水平和肺组织中MCP-1、COX-2、IFN-γ mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),血浆中PLT数量和F3含量均增高(P<0.05,P<0.01);肺组织中VE-cadherin、CLDN5、NG2蛋白荧光表达均减弱(P<0.05,P<0.01),Caspase11、GSDMD-N/GSDMD蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论 清瘟败毒饮通过抑制GSDMD-N和Caspase 11的活化，减少炎症因子的释放，减少失血和血管屏障功能的损伤，从而对脓毒症引起的肺损伤起到一定的改善作用。

关键词

脓毒症 / 肺损伤,F3 / Caspase11 / GSDMD / GSDMD-N / 清瘟败毒饮