黄芪-莪术-蚤休配伍调控PINK1/Parkin信号通路抑制小鼠结肠癌生长转移的研究

摘要

目的 探讨黄芪-莪术-蚤休（芪-术-蚤）角药配伍基于PINK1/Parkin/EMT信号通路抑制结肠癌生长和转移的影响。方法 30只BALB/c雄性小鼠，随机分为空白组、模型组、阳性对照组、芪-术-蚤高剂量组(5.85 g·kg^-1)、芪-术-蚤低剂量组(2.925 g·kg^-1),每组6只，使用结肠癌CT26.WT细胞构建小鼠原位结肠癌模型。给药15 d后，取各组小鼠肿瘤、肝脏组织，HE病理染色评估肿瘤转移情况，透射电镜观察肿瘤组织线粒体自噬现象，Western blot、免疫组化（IHC）检测线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、p62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达情况，Western blot、qPCR、IHC检测EMT相关E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白和mRNA表达情况。结果 与模型组相比，给药组小鼠肿瘤体积明显变小、转移灶数目变少，肝脏组织发生改变，小鼠生长状态得到明显改善；芪-术-蚤给药组肿瘤组织线粒体发生了选择性自噬现象，伴随着自噬小体的产生；芪-术-蚤给药组影响了PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬生物学过程：PINK1、Parkin、p62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均有一定程度上调（P<0.05,P<0.01）,且高剂量组效果优于低剂量组（P<0.05,P<0.01）;芪-术-蚤给药组降低了EMT相关N-cadherin、Vimentin、Snail的蛋白含量与mRNA水平（P<0.05,P<0.01）,同时增高了E-cadherin的蛋白与mRNA水平（P<0.05,P<0.01）,且高剂量组均优于低剂量组（P<0.05,P<0.01）。结论 芪-术-蚤角药配伍一定程度抑制结肠癌原位移植瘤小鼠模型肿瘤生长和转移，其机制可能是通过PINK1/Parkin信号通路扭转线粒体功能异常，抑制上皮-间质转化（EMT）过程，达到治疗结肠癌的作用。

关键词

芪-术-蚤 / 线粒体自噬 / PINK1/Parkin信号通路 / 上皮-间质转化 / 结肠癌