安正抗瘤方通过PI3K/Akt/mTOR通路抑制糖酵解抗结直肠癌作用机制研究

摘要

目的 探讨安正抗瘤方调控磷酯酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路抑制糖酵解抗结直肠癌的作用机制。方法 用安正抗瘤方干预人结直肠癌SW620细胞，检测细胞增殖、迁移能力。将42只BALB/c裸鼠随机分为空白对照组、模型组、5-氟尿嘧啶（5-FU）组(0.025 g·kg^-1)、安正抗瘤方低剂量组(7.67 g·kg^-1)、安正抗瘤方中剂量组(15.34 g·kg^-1)、安正抗瘤方高剂量组(30.68 g·kg^-1),通过观察体质量、瘤体体积、肿瘤质量、HE染色、Ki67免疫组织化学染色等指标，检测安正抗瘤方对裸鼠皮下移植瘤的抑制作用。采用高通量转录组测序技术，探讨模型组和安正抗瘤方中剂量组裸鼠肿瘤组织的差异表达基因及通路，探讨安正抗瘤方抗结直肠癌的潜在机制。葡萄糖测试盒、乳酸测试盒检测安正抗瘤方干预后SW620细胞及裸鼠肿瘤组织内葡萄糖消耗量与乳酸生成量的变化，Western blot检测安正抗瘤方干预后SW620细胞及裸鼠肿瘤组织内p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、己糖激酶2（HK2）、乳酸脱氢酶A（LDHA）蛋白表达水平的变化。结果 体外细胞实验显示，与空白对照组相比，安正抗瘤方干预后，SW620细胞增殖和迁移能力均下降（P<0.01）,葡萄糖消耗量及乳酸生成量均降低（P<0.05,P<0.01）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、HK2、LDHA蛋白表达水平均降低（P<0.05,P<0.01）。体内动物实验显示，与模型组相比，安正抗瘤方能够抑制裸鼠皮下移植瘤的生长（P<0.01）,使肿瘤组织坏死程度增加，肿瘤组织内葡萄糖消耗量及乳酸生成量均降低（P<0.05,P<0.01）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、HK2、LDHA蛋白表达水平均降低（P<0.05,P<0.01）。结论 安正抗瘤方具有抑制结直肠癌的作用，其作用机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制糖酵解有关。

关键词

安正抗瘤方 / 结直肠癌 / 糖酵解 / PI3K/Akt/mTOR信号通路 / SW620细胞