芪黄逐瘀方通过TNF信号通路减轻心肌梗死后抑郁的机制研究（英文）

摘要

目的 探讨芪黄逐瘀方改善心肌梗死后抑郁的作用机制，重点揭示其对心脑炎症反应的调控作用。方法 采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)结合网络药理学和分子对接分析芪黄逐瘀方活性成分及干预心肌梗死后抑郁的作用靶点；通过冠状动脉左前降支结扎联合慢性束缚应激建立心肌梗死后抑郁大鼠模型；超声心动图评估心功能，苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)染色评估心肌损伤，行为学实验检测抑郁样行为，尼氏(Nissl)染色评估海马神经元损伤，蛋白免疫印迹(Western blot)检测心脏及海马组织中肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)、肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、核因子κB(NF-κB)的表达；酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清IL-6、IL-10水平，免疫组化技术(IHC)检测TNFR1、TNFR2表达；体外实验中，通过大鼠心肌细胞系H9C2细胞和大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系高分化PC12细胞共培养，给予TNFR1抑制剂(H398)和TNFR2激动剂(C-6His)干预，通过Western blot检测TNFR2、PI3K、p-AKT、AKT,TNFR1、NF-κB、p-NF-κB等相关蛋白表达；TUNEL染色观察细胞凋亡情况；ELISA法检测细胞上清IL-6、IL-10水平。结果 网络药理学分析表明，TNF信号通路是芪黄逐瘀方治疗心肌梗死后抑郁的关键靶点；体内实验证实，芪黄逐瘀方干预可显著改善心肌梗死后抑郁大鼠的心功能、心肌组织与海马神经元结构损伤，并改善其抑郁样行为。分子层面，相较模型组，芪黄逐瘀方高剂量组显著上调心脏和海马组织中的TNFR2、p-AKT/AKT、IL-10的表达(P<0.01),下调TNFR1、p-NF-κB/NF-κB、IL-6(P<0.01)水平。体外实验表明，芪黄逐瘀方含药血清在H9C2和PC12细胞中显著上调TNFR2、p-AKT/AKT、IL-10(P<0.01),下调TNFR1、p-NF-κB/NF-κB、IL-6(P<0.01)的表达，并显著抑制细胞凋亡(P<0.01)。此外，联合应用H398或C-6His的实验进一步证实，芪黄逐瘀方保护及抗炎作用是通过调控TNFR2/PI3K/AKT与TNFR1/NF-κB通路介导的。结论 芪黄逐瘀方通过调节TNF通路改善心脑炎症稳态，并改善心肌梗死后抑郁大鼠的心肌损伤和抑郁状态。

关键词

心肌梗死 / 抑郁 / 炎症 / 芪黄逐瘀方

基金资助

国家自然科学基金面上项目(81973824);国家自然科学基金青年科学基金项目(82205028); 江苏省中医药管理局项目(k2021j17-2); 江苏省中医院项目(y2021rc06); 江苏省中医药科技发展规划项目(QN202118); 江苏省中西医结合协会青年科技人才支持项目(JSZXTJ-2024-B05); 江苏省青年科技人才支持项目(JSTJ-2024-577)