清肠化湿方对溃疡性结肠炎小鼠血清代谢及胆汁酸肠肝循环的影响

摘要

目的 探讨清肠化湿方治疗溃疡性结肠炎（UC）的可能作用机制。方法 50只C57BL/6雄性小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、清肠化湿方低剂量组、清肠化湿方高剂量组及5-氨基水杨酸（5-ASA）组。采用3%葡聚糖硫酸钠（DSS）饮水6 d构建UC模型小鼠，第7～8天，撤去DSS,每日给予超纯水饮用。实验全程给予超纯水或不同药物灌胃处理：正常组、模型组给予0.2 mL超纯水，清肠化湿方低、高剂量组分别给药6、12 g·kg^-1,5-ASA给药100 mg·kg^-1。同时记录每日小鼠体质量及粪便性状，第9天结束实验。收集小鼠血清用于血清代谢组学、炎症因子表达检测；分离小鼠结肠并测量其长度，留取结肠末端进行病理学分析；分离小鼠肝脏、结肠用于后续总胆汁酸检测。结果 与正常组相比，模型组小鼠体质量及结肠长度明显下降（P<0.000 1）,疾病活动指数（DAI）明显增高（P<0.000 1）,血清炎症因子IL-1β和TNF-α含量明显增加（P<0.000 1）,给予清肠化湿方高剂量、低剂量及5-ASA干预后可明显缓解小鼠体质量下降、DAI升高、结肠缩短及结肠组织形态消失等现象。通过ELISA检测发现清肠化湿方不同剂量及5-ASA干预后可降低血清中炎症因子IL-1β和TNF-α含量（P<0.01,P<0.000 1）。通过LC-MS检测血清代谢物改变并进行KEGG富集分析发现，清肠化湿方干预后可明显影响初级胆汁酸合成、次级胆汁酸合成与胆汁分泌。通过总胆汁酸试剂盒检测发现，与正常组小鼠相比，模型组小鼠肝脏总胆汁酸无明显改变、血清总胆汁酸含量明显减低、结肠中总胆汁酸含量明显增加（P<0.05）;给予清肠化湿方干预后可明显增加小鼠血清中总胆汁酸含量，降低结肠中总胆汁酸含量（P<0.01,P<0.05）。与正常组小鼠相比，模型组小鼠血清中脱氧胆酸（DCA）和牛磺酸脱氧胆酸（TDCA）含量明显降低（P<0.05）,给予清肠化湿方干预后可恢复小鼠血清中DCA、TDCA及熊去氧胆酸（UDCA）含量（P<0.01）。结论 清肠化湿方能有效改善DSS诱导肠炎小鼠结肠炎症，降低免疫炎症反应，改善小鼠血清代谢及胆汁酸肠肝循环紊乱现象。

关键词

溃疡性结肠炎 / 清肠化湿方 / 胆汁酸代谢 / 肠肝循环