基于脂质组学探究散寒化湿方治疗呼吸道合胞病毒肺炎模型小鼠的作用机制

摘要

目的 研究散寒化湿方对呼吸道合胞病毒（RSV）感染小鼠模型的治疗作用，并结合脂质组学探讨其潜在的抗病毒及抗炎机制。方法 将54只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、利巴韦林(50 mg·kg^-1·d^-1)组及SHF高(散寒化湿方15.46 g·kg^-1·d^-1)、SHF中(散寒化湿方7.73 g·kg^-1·d^-1)、SHF低(散寒化湿方3.87 g·kg^-1·d^-1)剂量组，每组9只。通过滴鼻感染RSV建立肺炎小鼠模型，各组小鼠连续灌胃给药3 d。分别采集各组小鼠肺组织样本，通过HE染色法及炎症评分评估各组小鼠的肺组织病理学变化；RT-qPCR法检测病毒融合蛋白（F）、糖蛋白（G）和炎症因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）]的mRNA表达水平以评估肺部病毒载量和炎症水平，同时免疫荧光染色观察RSV-F在肺组织中的表达；应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q Exactive Orbitrap MS）研究RSV感染小鼠的血清脂质组学变化。结果 与空白组相比，模型组小鼠肺部出现明显炎症细胞浸润与组织损伤，肺组织病理评分及肺指数明显升高，肺组织病毒载量及肺部炎症因子TNF-α、IL-6 mRNA水平表达显著增加，免疫荧光结果亦提示RSV-F在肺组织中高表达；与模型组比较，散寒化湿方治疗可明显改善肺组织损伤，并有效抑制病毒基因表达及炎症因子水平，同时减弱RSV-F在肺组织中的荧光信号强度。脂质组学研究显示，与空白组相比，模型组呈现明显脂质代谢异常，主要表现为甘油三酯（TG）、磷脂酰胆碱（PC）、溶血磷脂酰胆碱（LPC）、鞘磷脂（SM）、二酰甘油（DG）、溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）和磷脂酰乙醇胺（PE）等脂质代谢紊乱，散寒化湿方高剂量治疗可以调节RSV感染引发的上述脂质紊乱。结论 散寒化湿方能有效改善RSV感染引起的肺部炎症及病理损伤，降低肺部RSV病毒载量，可能与调节外周血脂质代谢紊乱有关。

关键词

散寒化湿方 / 呼吸道合胞病毒 / 肺炎 / 脂质组学 / 超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法 / 宿主免疫 / 脂质