益气活血方对缺血心肌线粒体中区与外周分裂的影响

摘要

目的 探究益气活血方（YQHX）对心肌梗死（MI）小鼠心肌线粒体中区与外周分裂的影响及作用机制。方法 采用左冠脉前降支结扎制备小鼠急性心肌梗死（AMI）模型，将48只C57BL/6N雄性SPF级小鼠，随机分为假手术组（Sham, n=12）和左冠脉前降支结扎MI模型（n=36）。MI术后，依据超声心动图结果对判定成模的小鼠随机分为模型组（MI, n=12）、YQHX组（n=12）和恩格列净组（EMPA, n=12）。术后4周，采用超声心动图、血清心肌损伤标志物、苏木精-伊红（HE）染色综合评估YQHX对MI小鼠心功能及心肌组织结构的影响；透射电镜（TEM）观察小鼠MI边缘区线粒体的超微结构、形态及数量变化；应用线粒体提取试剂盒提取心肌组织线粒体，通过Western blot检测心肌组织线粒体及胞浆中线粒体分裂相关蛋白的空间表达变化，包括线粒体动力相关蛋白1(Drp1)及其磷酸化位点（P-Drp1-Ser616）、线粒体分裂因子（MFF）和线粒体裂变因子1(Fis1)等蛋白表达。结果 YQHX显著提高MI 4周小鼠左室射血分数（LVEF）和左室短轴率（LVFS）(P<0.000 1)，明显降低左室舒张末期内径（LVIDd）和左室收缩末期内径（LVIDs）(P<0.05,P<0.01)，提示其改善MI小鼠的心功能。同时，YQHX组血清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）含量明显下降（P<0.05,P<0.001），表明其对缺血心肌有一定的保护作用。HE染色显示，YQHX组心肌细胞形态结构更加齐整，提示其可改善心脏组织结构。TEM结果显示，YQHX明显改善MI边缘区线粒体肿胀，减少线粒体碎裂，保护线粒体超微结构。Western blot结果进一步显示，YQHX明显降低MI边缘区胞浆中P-Drp1-Ser616表达（P<0.05），并减少心肌线粒体中Fis1表达（P<0.05），提示其抑制线粒体外周分裂；同时，YQHX促进心肌线粒体中MFF表达（P<0.01），提示其有助于增强中区分裂。结论 YQHX改善MI后心肌组织结构和功能障碍，其机制可能与维持缺血心肌线粒体中区分裂、抑制缺血心肌线粒体外周分裂有关。

关键词

益气活血方 / 心肌梗死 / 线粒体分裂 / 中区分裂 / 外周分裂