降气平哮方调控CLCA1/Ca²⁺/SNARE信号改善哮喘气道黏液高分泌的机制研究

摘要

目的 探讨降气平哮方调控Ca²⁺与膜融合过程对哮喘气道黏液高分泌的作用机制。方法 采用卵清蛋白致敏小鼠建立哮喘模型，设正常组，模型组，降气平哮方低(10.0 g·kg^-1)、中(20.0 g·kg^-1)、高(30.0 g·kg^-1)剂量组，地塞米松组(1.0 mg·kg^-1)和盐酸氨溴索组(8.0 mg·kg^-1)。在造模期间通过行为学观察小鼠状态、HE染色和PAS染色评估肺部病理状态，ELISA法检测小鼠肺部炎症因子白细胞介素（IL）-4与IL-13水平，qPCR检测黏蛋白mRNA表达，比色法检测小鼠肺组织中Ca²⁺浓度，免疫组织化学和Western blot法检测钙激活氯通道调节因子1（CLCA1）和膜融合相关蛋白的表达。结果 与正常组相比，模型组气道炎症评分，黏液分泌，IL-13、IL-4水平，Ca²⁺浓度及CLCA1、突触体相关蛋白23（SNAP23）、可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体（SNARE）、突触融合蛋白（STX3）、囊泡相关膜蛋白（VAMP）8和VAMP2的表达均显著升高（P<0.05,P<0.01,P<0.001）；与模型组相比，降气平哮方可有效改善哮喘小鼠的一般状况，显著减轻小鼠气道炎症和黏液分泌（P<0.05,P<0.001）；降低肺组织中IL-4、IL-13水平（P<0.001）；抑制黏蛋白基因的过表达（P<0.05,P<0.01,P<0.001）；减少细胞内Ca²⁺浓度（P<0.05,P<0.001）；下调CLCA1及SNAP23、SNARE、STX3、VAMP8、VAMP2等膜融合通路关键蛋白表达。结论 降气平哮方可能通过抑制CLCA1/Ca²⁺/SNARE信号减轻哮喘气道黏液高分泌，为降气平哮方治疗提供了新的分子机制靶点。

关键词

哮喘 / 降气平哮方 / 气道黏液高分泌 / CLCA1 / Ca²⁺ / 膜融合