苓桂术甘颗粒改善代谢功能障碍相关脂肪性肝炎的作用机制研究

摘要

目的 研究苓桂术甘颗粒通过调节脂质代谢、调控氧化应激和炎症反应改善代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）的作用机制。方法 采用西方饮食（高脂高胆固醇高果糖饮食）诱导建立MASH小鼠模型，检测其氧化应激、脂质代谢和炎症相关指标。使用0.75 mol·L^-1游离脂肪酸（FFA）[油酸钠（OA）∶棕榈酸钠（PA）=2∶1]诱导人源肝癌细胞HepG2，建立肝细胞脂肪变性模型，检测脂质变性细胞氧化应激、脂质代谢和炎症相关指标。结果 与正常组相比，模型组小鼠体质量和肝脏质量显著增加（P<0.001），血清中GLU、LDL-C、HDL-C、TC、ALT、AST含量均显著升高（P<0.05,P<0.001），肝组织病理损伤严重，肝脏内TC、TG、MDA含量显著升高（P<0.001），而GSH含量和SOD活性显著降低（P<0.001）。在分子水平上，模型组小鼠肝组织中PPARα的mRNA表达显著下调（P<0.001）,SREBP-1c、FAS、Toll样受体（TLR-2/4/9）、IL-1β、TNF-α、TGF-β1、COL1A1及α-SMA的mRNA表达均显著上调（P<0.001）；此外，NLRP3炎症小体及其下游效应蛋白Cleaved caspase-1的蛋白表达量也显著升高（P<0.05,P<0.001）；在HepG2细胞模型中，模型组细胞内脂滴相对面积，TC、TG和MDA含量均显著增加（P<0.001）,GSH含量和SOD活性显著降低（P<0.001），细胞内CPT1A、ACOX1、PPARα、ACADM、SIRT1、Nrf2、HO-1蛋白表达量均显著降低（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,NLRP3、Caspase-1、Cleaved caspase-1蛋白表达量显著升高（P<0.05,P<0.01）；与模型组相比，各给药组小鼠的血清中ALT和AST含量显著降低（P<0.001），高剂量给药组血清中LDL-C、HDL-C和GLU含量显著降低（P<0.05,P<0.001），肝脏病理损伤明显改善，肝脏内TC、TG、MDA含量显著降低（P<0.01,P<0.001），高剂量给药组肝脏中GSH含量和SOD活性显著升高（P<0.05,P<0.01）。同时，高剂量给药组肝组织PPARα的mRNA表达显著上调（P<0.001），各剂量给药组SREBP-1c、FAS、Toll样受体（TLR-2/4/9）、TNF-α、TGF-β1、COL1A1、α-SMA的mRNA表达显著下调（P<0.001），高剂量给药组中NLRP3、Caspase-1、Cleaved caspase-1蛋白表达量显著下降（P<0.05,P<0.01,P<0.001）。细胞实验中，200、400μg?mL^-1给药处理显著降低了HepG2脂质变性细胞内脂滴相对面积、TG和MDA含量（P<0.001），提高了GSH含量和SOD活性（P<0.01,P<0.001），并显著上调了细胞内CPT1A、ACOX1、PPARα、ACADM、SIRT1、Nrf2蛋白表达（P<0.05,P<0.01,P<0.001），下调了NLRP3、Caspase-1蛋白表达（P<0.05,P<0.001）。结论 苓桂术甘颗粒能够有效改善MASH小鼠肝脏组织病理损伤及HepG2细胞的脂质变性状态，其机制可能与调控SREBP与PPARα信号通路、促进脂质代谢调节有关；同时通过调控SIRT1/Nrf2/HO-1通路改善氧化应激，抑制NLRP3炎症小体通路减轻炎症反应。

关键词

西方饮食 / HepG2 / 代谢紊乱 / 代谢功能障碍相关性肝炎 / 苓桂术甘颗粒 / 脂质代谢 / 氧化应激 / 炎症