基于RCBTB1临床表达特征的益气化瘀解毒方抑制胃癌肝转移机制研究

摘要

目的 探讨鸟嘌呤核苷酸交换因子（RCBTB1）在胃癌中的差异表达和诊断预后预测的临床价值，研究益气化瘀解毒方抑制肿瘤相关成纤维细胞分泌的外泌体（CAFs-exo）诱导的胃癌肝转移的作用机制。方法 生物信息学结合免疫组化验证RCBTB1在胃癌组织中的表达及诊断预后意义；通过超速离心法分离、提取CAFs-exo，利用透射电镜、Western blot、纳米颗粒跟踪分析（NTA）检测以鉴定；采用划痕、Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力；构建胃癌荷瘤小鼠肝转移模型并用益气化瘀解毒方干预，检测肝转移瘤数量，苏木精-伊红（HE）染色检测肝脏中胃癌细胞浸润；Western blot检测相关分子表达；免疫荧光检测胃癌细胞对外泌体的摄取；活体成像观察外泌体在胃癌肝转移小鼠肝脏中的分布。结果 RCBTB1在胃癌组织中表达升高（P<0.001），且具有较高的诊断预测价值（AUC=0.857），其相关差异基因功能主要富集在细胞外基质调节、侵袭转移、细胞黏附等生物学行为以及Wnt/β-catenin信号通路中。RCBTB1在T4期胃癌中的表达量显著高于T2、T3期（P<0.01），在T2、T3期中，RCBTB1高表达胃癌患者临床预后更好（P<0.05），而在T4分期中，RCBTB1高表达胃癌患者预后较差（P<0.05）。益气化瘀解毒方能够显著抑制CAFs-exo诱导的胃癌细胞侵袭迁移能力（P<0.01）及胃癌荷瘤小鼠肝转移灶形成，上调RCBTB1、Ecadherin(P<0.001)，下调β-catenin、Snail表达（P<0.001）。同时，益气化瘀解毒方能降低胃癌细胞对外泌体的摄取能力，抑制外泌体在胃癌肝转移模型小鼠的肝脏中聚集。结论 RCBTB1在不同分期胃癌中存在差异表达，其在胃癌临床诊断、预后预测中具有重要价值，益气化瘀解毒方能通过阻断CAFs-exo传递并逆转RCBTB1介导的上皮间质转化（EMT）以抑制胃癌肝转移。

关键词

益气化瘀解毒方 / 胃癌肝转移 / 诊断预后 / 肿瘤相关成纤维细胞 / 外泌体 / RCBTB1 / 上皮间质转化