杏贝止咳颗粒治疗急性支气管炎的功效物质及作用机制研究

摘要

目的 阐明杏贝止咳颗粒治疗急性支气管炎的功效物质和作用机制。方法 通过网络药理学预测杏贝止咳颗粒潜在的功效物质和作用机制，随后通过大孔吸附树脂富集纯化得到功效物质并对其进行分离，通过体外炎症细胞模型筛选功效物质中抗炎活性成分，并建立关键成分（ECPs）组。最后利用脂多糖（LPS）气道滴鼻构建小鼠急性支气管炎模型，对杏贝止咳颗粒、功效物质、ECPs进行药效评价，采用RT-qPCR检测炎症介质的主要mRNA,Western blot检测NLRP3通路蛋白表达，并通过微生物群分析小鼠粪便中肠道菌群的多样性。结果 通过网络药理学预测杏贝止咳颗粒黄酮类成分具有抗炎功效，可能通过NLRP3信号通路治疗急性支气管炎。通过大孔吸附树脂得到60%乙醇洗脱部位为总黄酮部位（XBZK-60）,XBZK-60分离得到5个黄酮类化合物，分别为甘草苷、木蝴蝶苷A、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、白杨素-7-O-龙胆二糖苷、木蝴蝶苷B，通过体外炎症细胞模型筛选木蝴蝶苷A、白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、木蝴蝶苷B作为ECPs组。体内药效结果显示，与模型组相比，杏贝止咳颗粒组、XBZK-60组、ECPs组均能显著降低急性支气管炎小鼠肺泡灌洗液（BALF）中IL-6、IL-1β含量（P<0.05,P<0.01）;RT-qPCR结果表明各给药组均能显著降低急性支气管小鼠肺组织中IL-6、IL-1α、IL-1β及TNF-α表达（P<0.01）;Western blot结果表明各给药组均能显著下调急性支气管炎小鼠肺组织中Cleaved Caspase-1、ASC、NLRP3、TNF-α蛋白的表达（P<0.05,P<0.01）；肠道微生物分析表明，各给药组肠道微生物丰度与丰富度均显著提升，肠道微生物中有益菌Lachnospiraceae＿NK4A136＿group、Prevotellaceae＿UCG-001和Colidextribacter数量均显著高于模型组。结论 总黄酮类成分是杏贝止咳颗粒治疗急性支气管炎的功效物质，可通过调控NLRP3信号通路来实现抗炎作用。其中，木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B以及白杨素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷是总黄酮类中的关键成分。

关键词

杏贝止咳颗粒 / 急性支气管炎 / 网络药理学 / 功效物质 / 肠道微生物 / NLRP3信号通路 / 炎症 / 肺-肠轴

基金资助

国家工信部产业基础再造和制造业高质量发展专项（TC2308068）; 中药制药过程控制与智能制造技术国家重点实验室定向项目（SKL2023D01006）