盐酸小檗碱对人血红蛋白拟过氧化物酶活性的影响

摘要

目的 明确盐酸小檗碱（berberine hydrochloride, BH）对人血红蛋白（hemoglobin, Hb）拟过氧化物酶（peroxidase, POD）活性的影响并分析其作用机制。方法 采用紫外吸收光谱法测定Hb拟POD活性，确定最适pH和最适温度。采用不同浓度BH与Hb相互作用后测定POD活性，并通过Lineweaver-Burk双倒数作图判定其作用机制。采用荧光光谱法测定BH与Hb相互作用后荧光淬灭常数，判定荧光淬灭方式，计算结合位点数和结合常数。结果 Hb拟POD活性发挥的最适pH为6.37,最适温度为38.4℃。BH与Hb相互作用后POD活性的米氏常数K_m和最大反应速度V_max均变小，K_m/V_max比值不变。荧光淬灭常数随温度升高而变小，即BH可静态淬灭Hb荧光。BH与Hb具有1个结合位点，在25、30、37℃下的结合常数分别为为8.63×10～3、8.25×10～3、7.39×10～3 L/mol。结论 BH可反竞争性抑制Hb拟POD活性。

关键词

盐酸小檗碱 / 人血红蛋白 / 过氧化物酶