DTX2促进奥沙利铂耐药的结直肠癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化

摘要

目的 探讨DTX2对奥沙利铂耐药的结直肠癌（CRC/OXA）细胞的影响及作用机制。方法 利用CCK8检测奥沙利铂（OXA）对CRC细胞的抑制率，构建CRC/OXA细胞系，检测CRC/OXA细胞中DTX2的表达水平，利用基因工具干预CRC/OXA细胞，分为未转染组（con）、敲低组（DTX2-shRNA）及共转染组（DTX2-shRNA+pcDNA-Notch2）。采用平板克隆、划痕和Transwell侵袭实验检测改变DTX2的表达对CRC/OXA细胞增值、迁移侵袭能力的影响，并通过Western blotting检测各组中Notch2、NICD、Ecadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白的表达水平。利用SW620/OXA细胞同样分组行裸鼠移植瘤实验，体内验证对裸鼠成瘤及蛋白的影响。结果 OXA对CRC细胞有明显抑制作用，SW620和LoVo细胞IC50分别为6.00和8.00μmol/L，成功构建CRC/OXA细胞系，CRC/OXA细胞中DTX2表达量明显升高（P<0.01）。DTX2-shRNA组中CRC/OXA细胞明显抑制增值、迁移侵袭能力（P<0.05）,DTX2-shRNA+pcDNA-Notch2组可逆转增强CRC/OXA细胞增值、迁移侵袭的能力（P<0.05）。Notch2、NICD及Vimentin蛋白平均表达水平，在DTX2-shRNA组中明显降低，而DTX2-shRNA+pcDNA-Notch2组明显升高（P<0.01）;E-cadherin蛋白表达水平在以上两组中的趋势相反且有明显差异（P<0.01）。体内实验显示DTX2可明显促进SW620/OXA细胞移植瘤的生长及对应蛋白的变化（P<0.05）。结论 DTX2通过Notch2信号通路促进CRC/OXA细胞增值、迁移侵袭及上皮间质转化，DTX2可能作为提高OXA疗效的分子标志物。

关键词

deltex-2 / 结直肠癌 / Notch2信号通路 / 上皮间质转化 / 奥沙利铂,耐药