源自蛇毒的蛋白C激活剂通过调控HIF-1α抑制BNIP3活性氧生成保护人脐静脉内皮细胞免受缺氧-复氧损伤

摘要

目的 探究蛇毒天然组分蛋白C激活剂（PCA）抑制ROS生成发挥抗血管内皮细胞损伤作用及机制。方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞系（HUVECs），建立内皮细胞氧糖剥夺/再复氧（OGD/R）模型，检测PCA和2-ME2(HIF1α抑制剂)单独处理及合用对细胞ROS生成和HIF-1α、BNIP3、Beclin-1蛋白表达的影响。OGD/R细胞模型转染BNIP3特异性siRNA，分为空载组、干扰组、PCA组、干扰+PCA组，检测各组HIF1α、BNIP3、Beclin-1蛋白表达量及ROS含量。结果 抑制HIF1α表达研究结果表明，PCA处理后蛋白HIF-1α、BNIP3、Beclin-1表达水平增高（P<0.05）而ROS含量明显降低（P<0.05）,2-ME2+PCA组与PCA组相比，蛋白HIF-1α、BNIP3、Beclin-1表达水平降低（P<0.05），而ROS含量增高（P<0.05），与之相反，PCA+DMOG组与PCA组相比，蛋白HIF-1α、BNIP3、Beclin-1表达水平增高（P<0.05），而ROS含量降低（P<0.05）。BNIP3干扰研究结果显示，干扰组+PCA组与干扰组相比，蛋白BNIP3表达增高（P<0.05）,HIF-1α没有变化（P>0.05）,ROS含量降低（P<0.05）；干扰+PCA组与PCA组相比蛋白BNIP3、Beclin-1蛋白表达水平降低（P<0.05），而ROS含量都增高（P<0.05）。结论 蛇毒PCA通过调控HIF-1α上调BNIP3抑制OGD/R诱导HUVECs产生的ROS，发挥抗损伤作用。

关键词

内皮细胞氧糖剥夺/再复氧 / 蛋白C激活剂 / 线粒体自噬 / HIF-1α