金丝桃素通过调节小鼠小胶质细胞内CN-NFAT钙信号通路改善压力应激诱导的抑郁样行为

摘要

目的 探究金丝桃素（HY）通过钙调蛋白（CaM）介导引起钙调磷酸酶蛋白（CN）-活化T细胞因子（NFAT）钙信号通路变化调节压力应激引起的抑郁（DP）障碍并研究其机制。方法 将C57BL/6J小鼠随机分为正常组（Control组）、DP组和DP+HY组（15只/组），行为学测试旷场实验（PFT）、糖水偏好实验（SPT）、悬尾实验（TST）、黑白场实验（LDB）、新奇食物抑制实验（NSFT），免疫组化检测小鼠脑海马体1区（CA1）酪氨酸羟化酶（TH）阳性表达，ELISA检测小鼠血清5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NA）水平，Western blotting检测炎症因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-2(IL-2)及CN-NFAT通路相关蛋白表达水平。同时，将小胶质细胞（BV-2）分为Control组、脂多糖（LPS）组、LPS+HY组以及钙调磷酸酶抑制剂（CNIS）组，采用免疫荧光法检测离子钙结合接头分子1(IBA-1)阳性表达，ELISA检测细胞上清液5-HT、NA水平，Western blotting检测炎症因子IL-1β、IL-2和TNF-α以及CN-NFAT通路相关蛋白表达水平。结果 与Control组相比，DP组小鼠的PFT经过中间区域的次数、SPT糖水消耗率、LDB明暗箱之间的穿梭次数以及NSFT食物的摄食率都降低（P<0.05）,TST不动时间增加（P<0.05）,TH神经元的数量减少（P<0.05）,5-HT和NA的水平减低（P<0.05），促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β和IL-2）及CaM-CNNFAT钙信号通路的蛋白表达水平升高（P<0.05）,LPS组的IBA-1表达上升（P<0.05），神经递质水平（NA、5-HT）减少（P<0.05），促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β和IL-2）及CaM-CN-NFAT钙信号通路的蛋白表达量升高（P<0.05），与DP组相比，HY组均逆转了上述结果（P<0.05），与LPS组相比，CNIS组与HY组作用相似，对IBA-1表达及神经递质水平（NA、5-HT）和促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β和IL-2）及CaM-CN-NFAT钙信号通路的蛋白表达量均有逆转作用（P<0.05）。结论 HY对于压力应激诱导的DP样小鼠和激活态下BV-2的改善作用，可通过靶向降低CN-NFAT钙信号通路表达起有效作用。

关键词

金丝桃素 / 压力应激 / CN-NFAT信号通路 / 脂多糖 / 抑郁