紫花前胡苷通过抑制肠上皮细胞焦亡改善2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的小鼠实验性结肠炎

摘要

目的 探讨天然植物单体紫花前胡苷（Nod）对克罗恩病（CD）样结肠炎的影响及其作用机制。方法 建立脂多糖和三磷酸腺苷（ATP）联合诱导的结肠类器官焦亡模型，通过检测焦亡关键调节因子、通透性和促炎因子，探讨Nod对细胞焦亡、肠道屏障功能和炎症反应的影响。以2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）干预小鼠为CD动物模型，通过检测体质量、DAI评分、组织病理学分析、炎症评分、肠屏障功能和肠上皮细胞焦亡，探讨Nod对CD样结肠炎的治疗效果。通过网络药理学和体内、体外实验验证探索Nod保护肠上皮细胞焦亡的潜在机制。结果 脂多糖和ATP诱导的结肠类器官经Nod干预后显著抑制NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase-1和caspase-11的表达，改善肠道FITC-dextran(FD4,4000)通透性，以及降低IL-1β和IL-18水平（P<0.05）。在TNBS诱导的结肠炎小鼠中，Nod治疗后能缓解小鼠体质量下降幅度、降低DAI评分、改善炎症细胞浸润和炎症评分（P<0.05），并降低血清中FD4、I-FABP的含量与细菌移位至肠系膜淋巴结、脾和肝脏中比例（P<0.05）。Nod可抑制小鼠肠黏膜中NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase-1和caspase-11的表达（P<0.05）。网络药理学预测分析显示，Nod抗结肠炎可能与PI3K/Akt通路有关；体内外实验证实，Nod抑制PI3K/Akt通路的激活，且PI3K/Akt通路的激活剂（IGF-1）逆转了Nod对肠上皮细胞焦亡和肠屏障功能的保护作用（P<0.05）。结论 Nod至少部分通过抑制PI3K/Akt信号传导拮抗肠上皮细胞的焦亡，从而保护肠屏障功能和改善CD样结肠炎，有望成为一种新的CD治疗药物。

关键词

克罗恩病 / 紫花前胡苷 / 细胞焦亡 / 肠上皮细胞 / PI3K/Akt