SLC1A5通过促进M2型巨噬细胞极化促进肝癌进展

摘要

目的 探讨SLC1A5高表达在泛癌种的临床意义及其促进肝癌进展的机制。方法 利用癌症基因组图谱（TCGA）、国际肿瘤基因组协会（ICGC）等数据库探讨SLC1A5在泛癌种的表达水平及其与临床分期、淋巴结转移及生存预后的关系；利用EPIC、CIBERSORT、TIMER算法分析SLC1A5与免疫细胞浸润的关系，分析SLC1A5联合M2型巨噬细胞浸润水平与肿瘤预后的关系。利用慢病毒过表达系统构建过表达SLC1A5肝癌细胞株；利用小干扰RNA(siRNA)构建沉默SLC1A5(NC组、si-SLC1A5-1组、si-SLC1A5-2组)的肝癌细胞株；CCK-8增殖实验检测SLC1A5对肝癌细胞增殖的影响；利用过表达SLCA5稳转株（NC组，SLC1A5过表达组）构建肝癌皮下瘤模型，体内水平探讨SLC1A5对肝癌增殖的影响；利用共培养体系验证干扰和过表达SLC1A5肝癌细胞对巨噬细胞极化的影响。结果 SLC1A5主要定位于细胞膜上，SLC1A5在大多数肿瘤中均显著高表达（P<0.05），其表达水平与临床分期及淋巴结转移呈正相关（P<0.05）;SLC1A5高表达与多癌种不良预后相关（P<0.05）。在13个癌种中显示SLC1A5与免疫评分呈正相关，二者相关性在低级别胶质瘤（LGG）、肝癌（LIHC）及甲状腺癌（THCA）中最显著（P<0.05）。多癌种显示SLC1A5与巨噬细胞浸润水平呈正相关（P<0.05），该相关性在LGG及LIHC中最显著；而在包括肺鳞癌、胰腺癌、胃癌在内的5种肿瘤中，二者呈负相关（P<0.05）。生存分析发现SLC1A5高表达且M2型巨噬细胞高浸润水平的患者生存预后最差（P<0.05）;SLC1A5与免疫抑制相关基因、细胞因子及细胞因子受体表达呈正相关，该相关性在LGG、LIHC中最显著（P<0.05）。不同肝癌细胞株均高表达SLC1A5，过表达SLC1A5促进肝癌细胞增殖，干扰SLC1A5则抑制肝癌细胞增殖；体内实验验证过表达SLC1A5促进肝癌增殖。SLC1A5与M2型巨噬细胞极化分子标志物表达呈正相关，过表达SLC1A5促进M2型巨噬细胞极化并抑制T细胞分泌IFN-γ。结论 SLC1A5与多种肿瘤的临床分期、淋巴结转移、预后及免疫浸润水平相关；SLC1A5通过促进M2型巨噬细胞极化抑制T细胞功能来促进肝癌进展。

关键词

泛癌 / SLC1A5 / M2型巨噬细胞 / 肝癌 / 增殖