载脂蛋白C1高表达通过激活JAK2/STAT3信号通路促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖并抑制凋亡

High expression of apolipoprotein C1 promotes proliferation and inhibits apoptosis of papillary thyroid carcinoma cells by activating the JAK2/STAT3 signaling pathway

摘要

目的 探讨载脂蛋白C1（APOC1）在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中的表达及对PTC细胞增殖、凋亡及关键信号通路的影响。 方法 通过GEPIA 2及K-M数据库分析APOC1在PTC的表达及对预后的影响。采用免疫组织化学、Western blotting检测APOC1在PTC和癌旁组织中的表达以及3株PTC细胞和正常甲状腺Nthyori 3-1细胞的表达。采用细胞转染技术，构建APOC1敲低和过表达PTC细胞模型（TPC-1细胞和BCPAP细胞）；采用Western blotting和RT-qPCR分别在蛋白水平和mRNA水平检验细胞模型构建是否成功。通过生长曲线、集落形成实验检测敲低和过表达APOC1后细胞的生长情况和集落形成能力；通过流式细胞术检测敲低和过表达APOC1对细胞周期、凋亡的影响。采用RT-qPCR和Western blotting检测增殖及凋亡相关靶基因P21，P27，CDK4，CyclinD1，BCL-2，Bax，caspase-3/caspase-9 mRNA和蛋白以及JAK2/STAT3信号通路关键蛋白的变化。 结果 成功构建APOC1敲低和过表达PTC细胞模型；PTC组织及3个PTC细胞株APOC1表达高于癌旁组织和Nthyori 3-1细胞（P<0.001）。与对照组相比，沉默组细胞增殖能力减弱（P<0.05）；G0/G1期的细胞比例增高（P<0.01），S和G2期的细胞比例下降（P<0.05）；细胞凋亡率明显增高（P<0.05）；CDK4，CyclinD1，BCL-2 mRNA和蛋白表达量下调（P<0.05）；p-JAK2，p-STAT3蛋白表达下调（P<0.001）；增强组与沉默组结果相反：P21，P27，Bax，caspase-3/caspase-9 mRNA和蛋白表达下调（P<0.05）；p-JAK2，p-STAT3蛋白表达上调（P<0.001）。JAK2抑制剂AG490显著减弱过表达APOC1对BCPAP细胞JAK2/STAT3信号通路的激活效应（P<0.01）。 结论 APOC1可能通过激活JAK2/STAT3信号通路，缩短G0/G1期进程，促进PTC细胞增殖并抑制凋亡。

Abstract

Objective To investigate the expression of apolipoprotein C1 (APOC1) in papillary thyroid carcinoma (PTC) and its effects on proliferation and apoptosis of PTC cells. Methods The expression level of APOC1 in PTC and its impact on prognosis were analyzed using GEPIA 2 and Kaplan-Meier databases. Immunohistochemistry (IHC) and Western blotting were used to detect the expression of APOC1 in PTC and adjacent tissues and in 3 PTC cell lines and normal thyroid Nthyori 3-1 cells. In TPC-1 and BCPAP cells, the effect of Lipofectamine 2000-mediated transfection with APOC1 siRNA or an APOC1-overexpressing plasmid on cell growth and colony formation ability were examined by observing the growth curves and using colony-forming assay. The changes in cell cycle and apoptosis of the transfected cells were analyzed with flow cytometry. RT-qPCR and Western blotting were used to detect the changes in expressions of P21, P27, CDK4, cyclin D1, Bcl-2, Bax, caspase-3 and caspase-9 and the key proteins in the JAK2/STAT3 signaling pathway. Results APOC1 expression was significantly higher in PTC tissues and the 3 PTC cell lines than in the adjacent tissues and Nthyori 3-1 cells, respectively. In TPC-1 and BCPAP cells, APOC1 knockdown obviously reduced cell proliferative activity, increased the percentage of G0/G1 phase cells, lowered the percentages of S and G2 phase cells, promoted cell apoptosis, and downregulated mRNA and protein expression levels of CDK4, cyclin D1 and Bcl-2 and the protein levels of p-JAK2 and p-STAT3. APOC1 overexpression in the cells produced the opposite effects on cell proliferation, apoptosis, cell cycle and the mRNA and protein expressions. The application of AG490, a JAK2 inhibitor, strongly attenuated APOC1 overexpression-induced activation of the JAK2/STAT3 signaling pathway in BCPAP cells. Conclusion APOC1 overexpression promotes proliferation and inhibits apoptosis of PTC cells possibly by activating the JAK2/STAT3 signaling pathway and accelerating cell cycle progression.

Graphical abstract

关键词

甲状腺乳头状癌 / 载脂蛋白C1 / 增殖 / 凋亡 / JAK2/STAT3信号通路

Key words

papillary thyroid carcinoma / apolipoprotein C1 / proliferation / apoptosis / JAK2/STAT3 signaling pathway

甲状腺癌是常见的内分泌系统疾病，甲状腺乳头状癌（PTC）和甲状腺滤泡状癌（FTC）均起源于滤泡上皮细胞，占甲状腺癌的95%以上，其中PTC最常见^［1］。目前，PTC的发病机制还未明确阐明^［2］。载脂蛋白C1（APOC1）是载脂蛋白C家族中的小分子蛋白，主要在肝脏表达，与高密度脂蛋白和极低密度脂蛋白代谢密切相关^［3］，参与脂质运输、稳定脂蛋白结构^［4-6］。近年研究表明APOC1在肺癌^［7］、肝癌^［8］、肾癌^［9］、卵巢癌^［10］高表达。促进细胞增殖、迁移和侵袭；与结直肠癌细胞周期、凋亡密切相关^［11］；胃癌中APOC1的表达与肿瘤直径、肿瘤分期和淋巴结转移相关^［12］；并且乳腺癌患者血清APOC1水平高于健康人，其可作为乳腺癌的候选血清诊断生物标志物^［13］。JAK2/STAT3信号通路是细胞增殖过程中的关键通路，抑制该通路抑制细胞增殖、促进凋亡^［14］。课题组前期研究证实在PTC中APOC1与JAK2/STAT3信号通路相关^［15］，然而，APOC1是否通过JAK2/STAT3信号通路对PTC细胞周期、凋亡和增殖能力产生影响未见报道。

本研究拟探讨APOC1在PTC中的表达及改变APOC1水平对PTC细胞增殖、凋亡及JAK2/STAT3信号通路的影响，以期为APOC1参与PTC进展的分子机制提供有关证据。

1 材料和方法

1.1 组织标本

PTC组织芯片（ThyP120C-S01，上海芯超有限公司），该芯片已通过伦理委员会批准（伦理批号：W2024145）。40例PTC组织和癌旁组织（距肿瘤边缘2 cm以上）由河北北方学院附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科手术切除并提供。本实验经医院伦理委员会批准（伦理批号：W2024145），患者均已签署知情同意书。

1.2 细胞系及所需试剂

RPMI 1640培养基、胎牛血清（Gibco）；Janus激酶（JAK）2抑制剂AG490（MCE）；Lipofectamine 2000（赛默飞）；shRNAC、shRNA1、shRNA2、shRNA3、OERNAC、OEAPOC1质粒（和元）；逆转录试剂盒（天根）；2×Realab Green PCR Fast mixture（兰博利德）；实验相关引物（通用生物）；Trizol（艾德莱）；提蛋白试剂盒（普利莱）；实验相关抗体（Affinity）；细胞周期检测试剂盒（Elabscience）；细胞凋亡检测试剂盒（APE×BIO）；人甲状腺乳头状癌细胞株K1，TPC-1，BCPAP及人正常甲状腺细胞Nthyori 3-1细胞株（北纳创联研究院）。

1.3 细胞培养

将甲状腺癌细胞系K1，TPC-1，BCPAP及正常细胞系Nthyori 3-1取出复苏，分别用含有1%青、链霉素双抗、10%FBS的1640培养基培养，将其置于37 ℃恒温、5% CO₂培养箱中孵育。待细胞汇合度达90%及以上，用胰酶将细胞消化1∶2传代。

1.4 细胞转染和分组

对APOC1表达量最高的TPC-1细胞进行沉默，APOC1表达量最低的BCPAP细胞进行增强。实验分为APOC1沉默对照组（shRNAC）、沉默组（shRNA1，shRNA2，shRNA3）、增强对照（OENC）、增强组（OE）、增强OE+AG490组（OE组的基础上用50 μmol/L JAK2抑制剂AG490处理24 h）。按照Lipofectamine 2000说明书进行操作，将shRNAC，shRNA1，shRNA2，shRNA3质粒转入TPC-1细胞；OENC，OEAPOC1质粒转入BCPAP 细胞。

1.5 Western blotting

按照提蛋白试剂盒说明书操作提取蛋白，BCA法测定蛋白浓度，根据需要加入合适体积的loading buffer，置于95 ℃金属浴变性10 min，-20 ℃保存。上样量为60 μg，依据目的蛋白相对分子质量大小，参照Marker说明书，在SDS-PAGE凝胶相应位置切胶，再转移到PVDF膜上，5%~10%脱脂奶粉封闭，磷酸化抗体则用磷酸化封闭液封闭。APOC1（1∶950），β-actin（1∶850），CDK4（1∶450），CyclinD1（1∶450），BCL-2（1∶450），Bax（1∶450），P21（1∶450），P27（1∶950），caspase-3（1∶450），caspase-9（1∶450），p-JAK2（1∶450），t-JAK2（1∶450），p-STAT3（1∶450），t-STAT3（1∶450）一抗4 ℃过夜，次日摇床复温30 min，二抗（1∶9000）孵育，显影。

1.6 免疫组化染色（IHC）

组织芯片烤片，二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水，微波炉加热枸橼酸钠抗原修复液，高火3 min至修复液沸腾，解冻20 min保持沸腾状态，通风处30 min晾凉。PBS 5 min洗3次，3% H₂O₂室温孵育10 min，APOC1一抗（1∶100）稀释，4 ℃冰箱孵育过夜。第2天复温30 min，PBS充分洗净一抗，二抗（1∶4500）37 ℃孵育1 h，PBS 5 min洗3次。DAB显色，苏木素染细胞核，盐酸酒精分化，2%氨水返蓝，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

1.7 免疫细胞化学染色（ICC）

胰酶消化K1，TPC-1，BCPAP，Nthyori 3-1细胞，细胞浓度调整至1×10⁶/L，六孔板中放入灭菌的盖玻片，分别滴入600 μL细胞，置于细胞培养箱，待细胞贴壁后补齐至2 mL培养液。细胞密度达到80%后，PBS洗两次，4%多聚甲醛4 ℃固定过夜。PBS 5 min洗3次，Triton×100破膜15 min，PBS 5 min洗3次，3% H₂O₂室温孵育20 min，PBS 5 min洗3次，APOC1一抗（1∶100）稀释，4 ℃过夜。复温30 min，PBS 5 min洗3次，二抗（1∶4500）37 ℃孵育1 h，PBS 5 min洗3次。DAB显色，苏木素染核，盐酸酒精分化，2%氨水返蓝，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

1.8 RT-qPCR

用Trizol法分别提取细胞总RNA，反转录为cDNA，以β-actin作为内参，按照试剂盒说明设置反应体系及条件。采用{\mathrm{2}}^{-\mathrm{\Delta }\mathrm{\Delta }\mathrm{C}\mathrm{t}}方法计算内参及目的基因相对表达量（表1）。

1.9 集落形成实验

取生长状态良好的沉默对照、沉默、增强对照及增强组的细胞各1000个，分别接种在六孔板，培养7~10 d，PBS洗2次，4%多聚甲醛固定15 min，去除固定液，姬姆萨染色30 min，流水洗去染液，空气干燥。拍照，计数大于50个细胞的集落团。

1.10 生长曲线

取对数生长期的沉默对照、沉默、增强对照及增强组的细胞，胰酶消化，计数，分别按照3×10⁴/孔加入细胞，接种在96孔板，每组设置3个复孔，置于IncuCyte ZOOM 中培养，并每隔3 h实时拍照。每24 h对细胞进行换液，以保证细胞状态良好，待细胞长满，分析数据。

1.11 细胞周期

收集数量约为5×10⁵/组，分为沉默对照、沉默、增强对照及增强组，1500 r/min，5 min离心，弃上清。加入1.2 mL无水乙醇与300 μLPBS的混合液，混匀后-20 ℃过夜。第2天1500 r/min，5 min离心，弃上清，加入1 mL PBS重悬，室温15 min。1500 r/min，5 min离心，弃上清，加入100 μL RNaseA充分混匀，37 ℃水浴30 min。加入400 μL PI（50 μg/mL）充分混匀，4 ℃避光30 min，立即上机，测488 nm处红色荧光。

1.12 细胞凋亡

取沉默对照、沉默、增强对照及增强组的细胞，使用不含EDTA的胰酶消化，收集细胞数量约为5×10⁵/组，预冷的PBS洗涤细胞，1500 r/min，5 min离心，弃上清，将细胞重悬于500 μL 1×Binding Buffer中。加入5 μL Annexin V-Cy3和1 μL SYTOX Green轻轻混匀，4 ℃避光孵育20 min。立即用流式细胞仪检测，Annexin V-Cy3的荧光在发射波长570 nm的信号可以通过FL2通道检测；SYTOX Green最大激发波长为504 nm，最大发射波长为523 nm，可以通过FL1通道检测。

1.13 统计学分析

采用SPSS25.0软件以及GraphPad Prism 9.0 统计软件对实验数据进行分析。计量资料用均数±标准差表示，组间比较采用t检验或单因素方差分析。计数资料用频数表示，组间比较采用χ²检验。以P<0.05为差异有统计意义。

2 结果

2.1 生物信息学分析APOC1基因表达

与癌旁组织相比，APOC1在PTC组织中的表达水平上调，差异有统计学意义（P<0.05， 图1A）；利用Kaplan-Meier数据库分析APOC1 mRNA的表达与患者预后的关系，APOC1 mRNA低表达与较差的总生存期（OS）及无复发生存期（RFS）呈正相关（P<0.001，图1B、C）。

2.2 临床样本APOC1在PTC组织及癌旁组织的表达情况

Western blotting实验结果显示APOC1在40例PTC患者癌组织中的表达水平高于癌旁组织（P<0.001，图2）。

2.3 APOC1与临床病理参数的关系

IHC结果表明APOC1在PTC标本中的表达量较癌旁组织明显（图3）。PTC患者APOC1的表达水平与性别、年龄无关；与肿瘤大小、临床分期及是否发生淋巴结转移成正相关，且差异具有统计学意义（P<0.05，图3、表2）。

2.4 免疫细胞化学检测APOC1在不同细胞系中的表达

APOC1阳性信号主要在胞浆表达，甲状腺癌细胞系K1，TPC-1，BCPAP的APOC1阳性信号明显高于正常细胞系Nthyori 3-1，其中TPC-1细胞APOC1表达最高，BCPAP最低（图4）。

2.5 APOC1在不同细胞系中的表达

相较于正常细胞系Nthyori 3-1，甲状腺癌细胞系K1，TPC-1，BCPAP的APOC1表达上调，其中APOC1在TPC-1细胞中表达量最高，BCPAP细胞中表达量最低（P<0.001，图5）。

2.6 鉴定APOC1的沉默效率

选择APOC1表达最高的TPC-1细胞进行沉默，相较于shRNAC组、shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组APOC1基因表达的蛋白及mRNA表达水平均下调，尤其shRNA1组和shRNA2组基因敲减效果更好，差异具有统计学意义（P<0.05，图6、7），所以我们选择shRNA1和shRNA2片段进行后续实验。

2.7 鉴定APOC1的增强效率

选择APOC1表达最低的BCPAP细胞进行增强，与OENC组相比，OE组表现出良好的基因增强效果，差异具有统计学意义（P <0.01，图8）。

2.8 APOC1对甲状腺乳头状癌TPC-1及BCPAP细胞增殖的影响

集落形成实验结果表明，shRNA1组和shRNA2组比shRNAC组细胞克隆数量减少，单个细胞成活率降低；相比OENC组，OE组细胞克隆形成能力增强（P<0.001，图9A~D）。生长曲线数据显示，与shRNAC组相比，沉默APOC1后，shRNA1组和shRNA2组在铺板后的36 h生长速率出现差异，108 h时最明显；增强APOC1后，OE组BCPAP细胞生长速率加快，高于OENC组，108 h时最明显（P<0.05，图9E~H）。

2.9 APOC1对甲状腺乳头状癌TPC-1及BCPAP细胞周期的影响

shRNA1组和shRNA2组G0/G1期细胞比例高于shRNAC组，而S期和G2期细胞比例低于shRNAC组；OE组G0/G1期细胞比例低于OENC组，S期和G2期细胞比例高于OENC组（P<0.05，图10）。

2.10 APOC1对甲状腺乳头状癌TPC-1及BCPAP细胞凋亡的影响

流式细胞术结果显示，相比shRNAC组，shRNA1组和shRNA2组细胞凋亡率增加；OE组细胞凋亡率小于OENC组，差异具有统计学意义（P<0.01，图11）。

2.11 APOC1的水平对细胞周期、凋亡蛋白及mRNA的影响

相比shRNAC组，shRNA1组和shRNA2组CDK4，CyclinD1，BCL-2蛋白和mRNA表达量下调；P21，P27，Bax，caspase-3/caspase-9蛋白和mRNA表达上调（P<0.05）。OE组CDK4，CyclinD1，BCL-2蛋白和mRNA表达量高于OENC组；P21，P27，Bax，caspase-3/caspase-9蛋白和mRNA表达量低于OENC组，差异具有统计学意义（P<0.05，图12）。

2.12 APOC1的表达对JAK2/STAT3信号通路的影响

shRNA1组和shRNA2组p-JAK2/t-JAK2，p-STAT3/t-STAT3比值小于shRNAC组（P<0.001，图13A、B）；OE组和OE+AG490组p-JAK2/t-JAK2，p-STAT3/t-STAT3比值大于OENC组（P<0.01，图13C、D），50 μmol/L AG490处理OE组24 h后，JAK2/STAT3信号通路部分被阻断，OE+AG490组部分抑制了过表达APOC1上调JAK2/STAT3磷酸化水平的效应（图13D）。

3 讨论

PTC作为第7大常见癌症，威胁人民健康^［16］。由于影像及活检等检查手段的推广普及，PTC检出率大幅提升^{［17， 18］}，过度诊断及治疗会引起严重经济负担^［19］。寻找并确定新的分子靶点对甲状腺癌的诊断和预后十分必要。

本研究GEPIA 2数据库显示，PTC组织中APOC1基因高表达。为确定APOC1在PTC中的临床意义，58对PTC及癌旁组织的IHC结果显示，APOC1在PTC组织中高表达且APOC1与PTC患者的肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移呈正相关，说明APOC1高表达参与PTC进展。然而，APOC1在PTC中的作用机制尚不明确。

细胞增殖在机体组织修复和代谢过程中发挥着重要作用，而慢性炎症、免疫缺陷和致癌病毒感染等可导致细胞失去正常调控，发展成恶性肿瘤^［20］。为明确APOC1在PTC中的作用，本研究构建了沉默与过表达细胞模型。生长曲线和集落形成实验显示沉默组36h生长速率出现差异，且108 h差异明显，细胞增殖能力减弱、克隆形成能力下降；流式细胞术显示G0/G1期细胞比例增加，S期及G2期细胞比例下降，细胞周期明显阻滞于G0/G1期。细胞周期由G0/G1期、S期、G2期和M期组成，细胞周期调控有2个重要的检查点：G1/S期和G2/M期检查点：CyclinD1-CDK4是G1期重要的调控蛋白，控制细胞由G1期进入S期，加快周期进程^［21］。P21，P27为细胞周期蛋白依赖性激酶（CDKs）的抑制因子，抑制CDKs活性调控细胞周期，阻断细胞由G1期进入S期，细胞周期受到阻滞，抑制肿瘤进展^［22］。本研究中Western blotting实验结果显示，沉默组CyclinD1，CDK4蛋白表达下调，P21，P27蛋白表达上调导致细胞周期阻滞于G0/G1期，增殖能力下降；增强组CyclinD1，CDK4蛋白表达上调，P21，P27蛋白表达下调。生长曲线、集落形成和细胞周期结果与沉默组相反，G0/G1期缩短，细胞周期进程加快。可见，APOC1通过调节周期相关蛋白促进细胞增殖。但APOC1在胆管癌中起到负性调控的作用，通过下调β-catenin抑制Wnt/β-catenin 信号通路，周期相关蛋白CDK2，CDK4，CyclinD1表达下调；P21上调，使胆管癌细胞阻滞于G0/G1期，抑制细胞增殖^［23］。

凋亡失调时，肿瘤细胞逃脱免疫系统的监视，促进其恶性增殖和转移^［24］。为明确APOC1对细胞凋亡的影响，本研究中流式细胞术结果显示细胞凋亡率增加；过表达组细胞凋亡受抑制。BCL-2家族在线粒体凋亡途径中不可忽视，BCL-2表达上调，与Bax形成异源二聚体，线粒体中细胞色素C释放抑制，凋亡受到阻滞；而Bax表达上调时，与BCL-2形成同源二聚体，结合线粒体膜上的通道增加其通透性，Cytochrome C释放增加，促进细胞凋亡^［25］。Caspase-3和caspase-9是caspase家族中的关键酶，其中caspase-9是凋亡途径中的启动子，通过与Cytochrome C，凋亡因子1（Apaf-1）结合形成复合体启动凋亡过程，进而激活细胞凋亡执行者caspase-3^［26］。本研究中，APOC1沉默组Bax，caspase-3，caspase-9蛋白表达上调，BCL-2蛋白表达下调；诱导细胞凋亡；增强组与之相反，Bax，caspase-3/caspase-9蛋白表达下调，BCL-2蛋白表达上调，凋亡率下降。可见，APOC1可能通过线粒体途径抑制PTC细胞凋亡。与APOC1增强结直肠癌^［11］、胰腺癌^［27］和肝癌^［28］增殖能力，抑制凋亡的研究结果一致。且结直肠癌中APOC1通过激活p38 MAPK信号通路上调CyclinD1，CyclinB1，BCL-2下调caspase-9促进细胞增殖且抑制凋亡^［11］。本研究中，APOC1通过线粒体途径抑制细胞凋亡，促进PTC进展。

APOC1可以靶向线粒体载体蛋白2（MTCH2）上调Bax，caspase-3表达，下调BCL-2促进骨肉瘤的进展^［29］。肝癌中APOC1下调能抑制p-ERK、p-AKT、Bcl-2蛋白表达和促进cleaved caspase-3蛋白表达， 抑制肝癌细胞增殖，诱导其凋亡^［28］。食管癌中，APOC1上调c-Raf激活MAPK/ERK信号通路，CyclinD1表达量增加促进食管癌细胞增殖^［30］。Western blotting结果表明，OE组JAK2、STAT3磷酸化水平升高，p-JAK2/t-JAK2，p-STAT3/t-STAT3比值升高；OE+AG490组JAK2、STAT3磷酸化水平降低，p-JAK2/t-JAK2，p-STAT3/t-STAT3比值减小，反转了OE-APOC1对JAK2/STAT3信号通路激活的效应。沉默APOC1后，JAK2、STAT3磷酸化和关键蛋白表达被抑制。与课题组前期研究和国外多位学者关于抑制JAK2/STAT3信号通路激活，JAK2、STAT3磷酸化水平降低，减弱增殖能力、减少炎症和诱导凋亡结果一致^{［15， 31-33］}。JAK2/STAT3信号通路参与炎症反应^［34］并且在肿瘤细胞耐药性^［35］、细胞增殖^［36］和细胞凋亡^［37］中起着关键作用，从而增强肿瘤的恶性生物学行为^［38］。JAK2/STAT3信号通路在胃癌中被过度激活，促进关键蛋白p-JAK2，p-STAT3表达，增强胃癌细胞的增殖能力并抑制凋亡^［39］。此外，激活JAK2/STAT3信号通路可引起免疫抑制甚至免疫逃逸^［40］，从而有助于肿瘤迁移^［41］和侵袭^［42］。

综上所述，本研究证实APOC1在PTC中高表达，参与疾病进展与患者不良预后相关，其机制可能是通过调控JAK2/STAT3信号通路从而影响PTC细胞增殖和凋亡。但是，本研究仍然存在一定局限性。由于只做体外细胞学实验，没有涉及动物实验，缺乏严谨性，后续研究会补充缺失部分，为PTC的诊断和治疗提供新的靶点。

参考文献

[1] 陈一峰, 郑泽荣, 林进吉, 等. 甲状腺乳头状癌合并滤泡癌10例临床病理分析[J]. 临床与实验病理学杂志, 2020, 36(4): 464-6.

[2] Li R, Zhang YJ, Xiang RQ, et al. Analysis of the mechanism of maslinic acid on papillary thyroid carcinoma based on RNA-seq technology[J]. Evid Based Complement Alternat Med, 2022, 2022: 7000531.

[3] Jong MC, Hofker MH, Havekes LM. Role of ApoCs in lipoprotein metabolism: functional differences between ApoC1, ApoC2, and ApoC3[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 1999, 19(3): 472-84.

[4] Fuior EV, Gafencu AV. Apolipoprotein C1: its pleiotropic effects in lipid metabolism and beyond[J]. Int J Mol Sci, 2019, 20(23): 5939.

[5] Zhou XP, Chen Y, Mok KY, et al. Non-coding variability at the APOE locus contributes to the Alzheimer's risk[J]. Nat Commun, 2019, 10(1): 3310.

[6] Cao XY, Wu BQ, Guo SM, et al. APOC1 predicts a worse prognosis for esophageal squamous cell carcinoma and is associated with tumor immune infiltration during tumorigenesis[J]. Pathol Oncol Res, 2023, 29: 1610976.

[7] Mei LH, Long J, Wu SE, et al. APOC1 reduced anti-PD-1 immunotherapy of nonsmall cell lung cancer via the transformation of M2 into M1 macrophages by ferroptosis by NRF2/HO-1[J]. Anticancer Drugs, 2024, 35(4): 333-43.

[8] Hao XP, Zheng ZY, Liu HY, et al. Inhibition of APOC1 promotes the transformation of M2 into M1 macrophages via the ferroptosis pathway and enhances anti-PD1 immunotherapy in hepatocellular carcinoma based on single-cell RNA sequencing[J]. Redox Biol, 2022, 56: 102463.

[9] Jiang H, Tang JY, Xue D, et al. Apolipoprotein C1 stimulates the malignant process of renal cell carcinoma via the Wnt3a signaling[J]. Cancer Cell Int, 2021, 21(1): 41.

[10] Yang SM, Du JX, Wang W, et al. APOC1 is a prognostic biomarker associated with M2 macrophages in ovarian cancer[J]. BMC Cancer, 2024, 24(1): 364.

[11] Ren H, Chen ZH, Yang L, et al. Apolipoprotein C1 (APOC1) promotes tumor progression via MAPK signaling pathways in colorectal cancer[J]. Cancer Manag Res, 2019, 11: 4917-30.

[12] Yi J, Ren LW, Wu J, et al. Apolipoprotein C1 (APOC1) as a novel diagnostic and prognostic biomarker for gastric cancer[J]. Ann Transl Med, 2019, 7(16): 380.

[13] Yan Y, Zhou YH, Wang K, et al. Apolipoprotein C1 (APOC1), A candidate diagnostic serum biomarker for breast cancer identified by serum proteomics study[J]. Crit Rev Eukaryot Gene Expr, 2022, 32(4): 1-9.

[14] Lei B, Qian L, Zhang YP, et al. MLAA-34 knockdown shows enhanced antitumor activity via JAK2/STAT3 signaling pathway in acute monocytic leukemia[J]. J Cancer, 2020, 11(23): 6768-81.

[15] 李超友, 罗亚星, 孙新民, 等. 载脂蛋白C1在甲状腺乳头状癌中的临床表达及生物信息学分析[J]. 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志, 2021, 27(4): 445-51.

[16] 王培宇, 黄 祺, 王少东, 等. 《全球癌症统计数据2022》要点解读[J]. 中国胸心血管外科临床杂志, 2024, 31(7): 933-54.

[17] Miranda-Filho A, Lortet-Tieulent J, Bray F, et al. Thyroid cancer incidence trends by histology in 25 countries: a population-based study[J]. Lancet Diabetes Endocrinol, 2021, 9(4): 225-34.

[18] Vaccarella S, Franceschi S, Bray F, et al. Worldwide thyroid-cancer epidemic? the increasing impact of overdiagnosis[J]. N Engl J Med, 2016, 375(7): 614-7.

[19] Li MM, Meheus F, Polazzi S, et al. The economic cost of thyroid cancer in France and the corresponding share associated with treatment of overdiagnosed cases[J]. Value Health, 2023, 26(8): 1175-82.

[20] Ishijima T, Nakajima K. Mechanisms of microglia proliferation in a rat model of facial nerve anatomy[J]. Biology, 2023, 12(8): 1121.

[21] Cai ZJ, Wang JR, Li YD, et al. Overexpressed Cyclin D1 and CDK4 proteins are responsible for the resistance to CDK4/6 inhibitor in breast cancer that can be reversed by PI3K/mTOR inhibitors[J]. Sci China Life Sci, 2023, 66(1): 94-109.

[22] Coqueret O. New roles for p21 and p27 cell-cycle inhibitors: a function for each cell compartment[J]? Trends Cell Biol, 2003, 13(2): 65-70.

[23] 王钦磊. APOC1通过Wnt/β-catenin信号通路诱导G0/G1期阻滞抑制胆管癌细胞增殖的机制研究[D]. 青岛: 青岛大学, 2024.

[24] Pu HC, Qian Q, Wang FL, et al. Schizandrin A induces the apoptosis and suppresses the proliferation, invasion and migration of gastric cancer cells by activating endoplasmic reticulum stress[J]. Mol Med Rep, 2021, 24(5): 787.

[25] Zhang Y, Yang X, Ge XH, et al. Puerarin attenuates neurological deficits via Bcl-2/Bax/cleaved caspase-3 and Sirt3/SOD2 apoptotic pathways in subarachnoid hemorrhage mice[J]. Biomed Pharmacother, 2019, 109: 726-33.

[26] Guan HM, Li WQ, Liu J, et al. LncRNA HIF1A-AS2 modulated by HPV16 E6 regulates apoptosis of cervical cancer cells via P53/caspase9/caspase3 axis[J]. Cell Signal, 2022, 97: 110390.

[27] Takano S, Yoshitomi H, Togawa A, et al. Apolipoprotein C-1 maintains cell survival by preventing from apoptosis in pancreatic cancer cells[J]. Oncogene, 2008, 27(20): 2810-22.

[28] 宋慧娟, 徐振华, 何东宁. 载脂蛋白C1表达对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其机制[J]. 吉林大学学报: 医学版, 2024, 50(1): 128-35.

[29] Li RJ, He HX, He XX. APOC1 promotes the progression of osteosarcoma by binding to MTCH2[J]. Exp Ther Med, 2023, 25(4): 163.

[30] 余以珊. APOC1通过MAPK/ERK通路促进食管鳞状细胞癌增殖及转移的机制研究[D]. 济南: 山东大学, 2023.

[31] Gao FF, Chen JL, Zhang TT, et al. LPCAT1 functions as an oncogene in cervical cancer through mediating JAK2/STAT3 signaling[J]. Exp Cell Res, 2022, 421(1): 113360.

[32] Judd LM, Menheniott TR, Ling H, et al. Inhibition of the JAK2/STAT3 pathway reduces gastric cancer growth in vitro and in vivo [J]. PLoS One, 2014, 9(5): e95993.

[33] Fu LX, Lian QW, Pan JD, et al. JAK2 tyrosine kinase inhibitor AG490 suppresses cell growth and invasion of gallbladder cancer cells via inhibition of JAK2/STAT3 signaling[J]. J Biol Regul Homeost Agents, 2017, 31(1): 51-8.

[34] Brooks AJ, Putoczki T. JAK-STAT signalling pathway in cancer[J]. Cancers, 2020, 12(7): 1971.

[35] Xing ZY, Wang X, Liu JQ, et al. Effect of miR-210 on the chemosensitivity of breast cancer by regulating JAK-STAT signaling pathway[J]. Biomed Res Int, 2021, 2021: 7703159.

[36] Cheng X, PKKYeung, Zhong K, et al. Astrocytic endothelin-1 overexpression promotes neural progenitor cells proliferation and differentiation into astrocytes via the Jak2/Stat3 pathway after stroke[J]. J Neuroinflammation, 2019, 16(1): 227.

[37] Yin Z, Ma TT, Lin Y, et al. IL-6/STAT3 pathway intermediates M1/M2 macrophage polarization during the development of hepatocellular carcinoma[J]. J Cell Biochem, 2018, 119(11): 9419-32.

[38] Kim MS, Lee WS, Jeong J, et al. Induction of metastatic potential by TrkB via activation of IL6/JAK2/STAT3 and PI3K/AKT signaling in breast cancer[J]. Oncotarget, 2015, 6(37): 40158-71.

[39] Zhou JM, Wu A, Yu XT, et al. SIRT6 inhibits growth of gastric cancer by inhibiting JAK2/STAT3 pathway[J]. Oncol Rep, 2017, 38(2): 1059-66.

[40] Carpenter RL, Lo HW. STAT3 target genes relevant to human cancers[J]. Cancers, 2014, 6(2): 897-925.

[41] Wang JQ, Zhang Y, Song H, et al. The circular RNA circSPARC enhances the migration and proliferation of colorectal cancer by regulating the JAK/STAT pathway[J]. Mol Cancer, 2021, 20(1): 81.

[42] Li YJ, Wei J, Sun Y, et al. DLGAP5 regulates the proliferation, migration, invasion, and cell cycle of breast cancer cells via the JAK2/STAT3 signaling axis[J]. Int J Mol Sci, 2023, 24(21): 15819.

基金资助

河北省财政厅基金(ZF2023237)

张家口市科技计划项目(2311004A)

RIGHTS & PERMISSIONS

版权所有©《南方医科大学学报》编辑部2021