miR-155-5p介导PIK3R1负调控PI3K/AKT信号通路促进原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞增殖

摘要

目的 探讨miR-155-5p靶向作用于PIK3R1调控PI3K/AKT信号通路对原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞（pSSHSGECs）的影响。方法 通过双荧光素酶验证miR-155-5p与PI3K/AKT通路的靶向关系。利用TRAIL及INF-γ刺激细胞，模拟pSS-HSGECs细胞模型；空白组：HSGECs，模型组：TRAIL+INF-γ+HSGECs，空转组：TRAIL+INF-γ+HSGECs+miR-155-inhibitor-NC;miR-155抑制组：TRAIL+INF-γ+IHSGECs+miR-155-inhibitor;CKK-8法、流式细胞术、平板克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞周期及凋亡率、细胞增殖能力。ELISA、RT-PCR方法分别检测相关细胞因子、miR-155-5p表达。蛋白质免疫印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。结果 双荧光素酶检测结果表明，miR-155-5p与PI3K/AKT通路存在靶向关系，且PIK3R1mRNA为二者的结合位点。与空白组相比，模型组细胞活力、细胞克隆形成能力、IL-10、IL-4水平降低；细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率、PIK3R1mRNA蛋白相对表达显著升高（P<0.01）。与模型组及空转组相比，miR-155抑制组细胞活力、G1期比例、克隆形成能力、IL-10和IL-4水平上升；同时细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率及PIK3R1蛋白相对表达下降（P<0.05）。结论 miR-155-5p可靶向作用于PI3K1mRNA，负向调节PI3K/AKT信号通路的过表达，改善pSSHSGECs增殖与凋亡异常，调节炎症反应。

关键词

原发性干燥综合征 / miR-155-5p / PIK3R1 / PI3K/AKT信号通路 / 炎症因子