积雪草活性成分槲皮素通过介导STAT3磷酸化抑制IL-23/IL-17A炎症轴发挥抗银屑病作用

摘要

目的 探讨积雪草抗银屑病活性成分及其作用机制。方法 利用TCMSP、PharmMapper等数据库获取积雪草化合物和靶点，利用GeneCards数据库筛选银屑病相关的潜在靶点，Cytoscape 3.10.0软件导入积雪草活性成分、银屑病共同靶点制作“药物-活性成分-作用靶点”网络图，使用STRING数据库构建PPI网络，借助DAVID数据库进行通路富集分析。通过网络药理学筛选得到积雪草主要活性成分槲皮素、积雪草苷、积雪草酸，并将这3种活性成分（7.5、15、30、60μmol/L）作用于脂多糖（LPS）刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞炎症模型，Griess法检测细胞NO水平评价抗炎活性。ELISA检测TNF-α、IL-6细胞促炎因子的表达，RT-qPCR测定细胞IL-23、IL-17A、TNF-α、IL-6 mRNA的表达，Western blotting检测细胞p-STAT3(Tyr705)、p-STAT3(Ser727)的表达变化。结果 网络药理学研究分析获取积雪草靶点139个，银屑病靶点4604个，PPI网络图显示CASP3、EGFR、PTGS2和ESR1为治疗银屑病的关键靶点，分析得到槲皮素、积雪草苷、积雪草酸可能是积雪草抗银屑病关键活性成分。KEGG结果显示与癌症、IL-17以及MAPK信号通路相关。槲皮素、积雪草苷、积雪草酸处理细胞炎症模型，发现槲皮素表现出明显的抗炎活性，细胞NO水平降低（P<0.05）。与LPS组相比，槲皮素处理后细胞中TNF-α,IL-6促炎因子分泌减少（P<0.05）,IL-23、IL-17A、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平降低（P<0.05）,STAT3磷酸化的两个位点（Tyr705、Ser727）蛋白表达均明显下调（P<0.05）。结论 积雪草抗银屑病主要活性成分为槲皮素、积雪草苷和积雪草酸，其中关键成分槲皮素通过抑制NO产生、炎症因子TNF-α、IL-6的表达，并通过介导STAT3磷酸化调控IL-23/IL-17A炎症轴抑制炎症反应发挥抗银屑病作用。

关键词

积雪草 / 银屑病 / 槲皮素 / IL-23/IL-17A / 网络药理学