化橘红配方颗粒通过维持铁稳态并抑制脂质过氧化和铁死亡缓解斑马鱼脂肪性肝病

摘要

目的 探讨化橘红配方颗粒治疗脂肪性肝病（FLD）的药效作用和具体机制。方法 将受精后3 d的斑马鱼幼鱼随机分为空白组、模型对照组、化橘红配方颗粒处理组（16、32、64μg/mL），分别构建斑马鱼幼鱼非酒精性脂肪肝（NAFLD）和酒精性脂肪肝（ALD）模型，采用生存分析、病理组织切片、全鱼油红O染色和实时定量荧光PCR实验评价化橘红配方颗粒治疗FLD的药效，并从CAV1和铁代谢及铁死亡角度探讨其治疗FLD的具体机制，通过普鲁士蓝染色、DCFH-DA活体探针、丙二醛含量检测、实时定量荧光PCR实验和CAV1免疫组织化学染色分析化橘红配方颗粒治疗FLD的药效验证和具体机制。结果 化橘红配方颗粒能减轻斑马鱼幼鱼NAFLD和ALD模型中的脂质累积，减少脂肪酸合成酶、固醇调节元件结合蛋白1、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶、肿瘤坏死因子-α和白介素6的表达水平，升高载脂蛋白A1和PPARα表达水平。化橘红配方颗粒可以减少斑马鱼幼鱼NAFLD和ALD模型中肝脏的铁沉积，减少幼鱼体内的丙二醛和活性氧含量（P<0.05）。NAFLD状态下，不同浓度的化橘红配方颗粒可升高Tf、TfR、FPN和SLC7A11表达（P<0.05），中、高浓度的化橘红配方颗粒可升高谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达（P<0.05）;ALD状态下，斑马鱼幼鱼的Tf、TfR和FPN表达升高，不同浓度的化橘红配方颗粒可降低这些基因的表达（P<0.05）。化橘红配方颗粒对ALD状态下SLC7A11的表达无明显影响，但高浓度的化橘红配方颗粒可升高GPX4的表达（P<0.05），免疫组织化学染色和实时定量荧光PCR实验结果显示，在NAFLD和ALD状态下，斑马鱼幼鱼肝脏的CAV1升高，而中、高浓度的化橘红配方颗粒可明显改善评价两种脂肪肝状态下斑马鱼幼鱼肝脏的CAV1表达。结论 化橘红配方颗粒可减轻NAFLD和ALD的脂质累积和炎症反应，并通过减少CAV1的表达纠正NAFLD和ALD的铁稳态失衡、脂质过氧化和铁死亡。

关键词

脂肪性肝病 / 化橘红 / 配方颗粒 / 斑马鱼 / 铁死亡