miR-139-5p调控Notch/RBP-J/Hes1轴促进支气管哮喘骨髓间充质干细胞“归巢”

摘要

目的 通过将哮喘支气管上皮细胞与骨髓间充质干细胞共培养方式，观察miR-139-5p调控Notch1信号通路对哮喘骨髓间充质干细胞归巢的影响。方法 将大鼠骨髓间充质干细胞和支气管上皮细胞共培养，并予miR-139-5p mimics进行干预。实验分为阴性对照组（NC组：正常大鼠骨髓间充质干细胞+支气管上皮细胞共培养）、模型对照组（MC组：正常大鼠骨髓间充质干细胞+哮喘大鼠支气管上皮细胞共培养）、miR-139-5p mimics组（miR-139-5p mimics+MC）、miR-139-5p mimics-NC组（miR-139-5p mimics-NC+MC）。检测细胞活力和细胞周期变化；免疫荧光染色检测CXCR4、SDF-1表达；经细胞转染后观察miR-139-5p表达量和BMSCs归巢水平；免疫印迹观察Notch1/RBP-J/Hes1蛋白表达量；ELISA检测Th1、Th2相关因子表达情况。结果 与NC组比较，MC组miR-139-5p、IL-2、IL-12表达量降低（P<0.05）,BMSCs归巢水平增加，CXCR4、SDF-1、IL-5、IL-9表达升高（P<0.05）,Notch1、RBP-J、Hes1 m RNA、蛋白表达升高（P<0.05）。与MC组、miR-139-5p mimics-NC组比较，miR-139-5p mimics组miR-139-5p、BMSCs归巢水平升高，CXCR4、SDF-1、IL-2表达升高（P<0.05）,Notch1、RBP-J、Hes1m RNA、蛋白表达降低，IL-5、IL-9表达降低（P<0.05）。相关性分析显示，BMSCs归巢水平与miR-139-5p、IL-12呈正相关，SDF-1与miR-139-5p呈正相关（P<0.05）；与IL-5表达呈负相关，CXCR4与Activated Notch1表达呈负相关，SDF-1与Notch1表达呈负相关（P<0.05）。结论 miR-139-5p可能通过靶向Notch1信号通路促进哮喘骨髓间充质干细胞归巢，作用于Th1、Th2细胞因子表达，改善哮喘气道炎症。

关键词

支气管哮喘 / 骨髓间充质干细胞 / miR-139-5p / Notch1信号通路