丹参注射液调控TGF-β/Smad信号通路抑制腹膜透析液诱导HMrSV5细胞内皮-间充质转化机制

摘要

目的 研究丹参注射液对腹膜透析液诱导HMrSV5细胞发生内皮-间充质转化（EndMT）的影响，并从TGF-β/Smad信号通路分析其可能的作用机制，为临床使用提供实验依据。方法 CCK-8法、Western blotting筛选腹膜透析液诱导HMrSV5细胞发生EndMT的形成条件及丹参注射液安全浓度范围；取HMrSV5细胞，随机分成正常组、模型组、丹参注射液0.05%、0.1%、0.5%浓度组，除正常组外，其余各组加入40%腹膜透析液培养72 h诱发细胞EndMT，实验结束前24 h，各组加入不同浓度丹参注射液。CCK-8法检测细胞活力；ELISA法检测细胞上清中白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β (TGF-β)和血管内皮生长因子（VEGF）水平；Western blotting检测各组细胞E-钙粘着蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌激动蛋白（α-SMA）、p-Smad 2/3和Smad 7蛋白表达影响。结果 40%的腹膜透析液诱导HMrSV5细胞72 h后，可发生明显的EndMT；丹参注射液安全浓度范围为0.025%～1.5%。与正常组比较，模型组细胞活力明显下降；IL-6、TNF-α、TGF-β和VEGF水平明显升高；α-SMA、p-Smad 2/3等蛋白表达上调；E-cadherin和Smad7蛋白表达明显下降，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比，丹参注射液各浓度组可明显增加细胞活力，提高E-cadherin和Smad7蛋白表达明显，降低IL-6、TNF-α、TGF-β、VEGF水平和α-SMA、p-Smad2/3蛋白表达（P<0.05）。结论 丹参注射液对腹膜透析液诱导的EndMT有一定的改善作用，其机制可能与抑制TGF-β/Smad信号通路有关。

关键词

丹参注射液 / 腹膜透析液 / 内皮-间充质转化 / TGF-β/Smad信号通路 / 腹膜纤维化