PAD4抑制剂GSK484通过抑制H3Cit表达减轻小鼠脓毒症肺损伤后内皮功能障碍的发生

摘要

目的 探讨PAD4抑制剂（GSK484）对脓毒症后H3Cit表达的抑制作用，并探究其对脓毒症引起的内皮功能障碍的改善效果。方法 C57BL/6小鼠18只通过盲肠结扎穿孔术（CLP）构建小鼠脓毒症模型，实验分为假手术组，模型组和GSK484治疗组，6只/组，治疗组在术后第2天腹腔注射给予GSK484(4 mg/kg)。ELISA检测小鼠血清VEGF、ESM-1、IL-6、IL-1β水平，HE染色观察肺组织病理学变化，免疫荧光和Western blotting检测各组小鼠肺组织中F-actin、VE-cadherin、ZO-1蛋白表达，Western blotting检测肺组织VE-Cadherin和H3Cit蛋白表达情况。肺组织原代分离培养肺微血管内皮细胞，使用脂多糖（LPS,10μg/m L）干预24 h构建脓毒症模型。检测细胞成管能力，CCK-8检测细胞增殖，流式检测细胞凋亡，ELISA检测细胞上清中VEGF、ESM-1、IL-6、IL-1β水平。结果 与假手术组相比，脓毒症小鼠肺组织肺脏血管充血、肺泡断裂、肺泡腔及肺间质水肿、肺泡隔增厚、中性粒细胞浸润等，血清中炎症因子IL-6、IL-1β和内皮细胞因子VEGF、ESM-1含量均升高（P<0.05），肺组织中胞间连接蛋白F-actin、VE-cadherin、ZO-1表达降低，H3Cit蛋白表达升高（P<0.05）,GSK484治疗可以有效改善这些变化。LPS诱导肺微血管内皮细胞上清中炎症因子表达量升高、内皮细胞因子VEGF、ESM-1含量均升高（P<0.05），细胞成管能力降低；2.5μmol/L浓度GSK484处理可降低炎症因子和内皮细胞因子表达（P<0.05）。结论 GSK484的使用可有效抑制脓毒症后H3Cit表达，进一步改善脓毒症后内皮功能障碍的发生。

关键词

脓毒症 / 肺损伤 / PAD4抑制剂 / 小鼠肺微血管内皮细胞 / 内皮功能障碍 / GSK484