LINC00467高表达通过抑制AMPK/mTOR通路抑制细胞自噬促进肺腺癌细胞的增殖和转移

摘要

目的 探讨LINC00467对肺腺癌增殖和转移的影响及参与细胞自噬的机制。方法 体外培养人支气管上皮细胞16HBE和人肺腺癌细胞A549和H1299,A549和H1299细胞经慢病毒shlinc00467和shNC感染、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）和AMPK抑制剂BML-275处理。分别设置shNC组、shlinc00467组、shNC+3-MA组、shlinc00467+3-MA组、shNC+BML-275组和shlinc00467+BML-275组。实时荧光定量PCR检测细胞中LINC00467的表达，TCGA数据分析组织中LINC00467的表达以及对肺腺癌患者生存率和临床分期的影响，克隆形成实验检测细胞增殖情况，Transwell实验测定细胞迁移和侵袭能力，免疫荧光染色检测LC3的表达，Western blotting检测蛋白表达，GSEA富集分析LINC00467与自噬通路的相关性。结果 与16HBE细胞相比，LINC00467在A549和H1299细胞中表达增加（P<0.001）。与癌旁组织相比，肺腺癌组织中LINC00467高表达（P<0.001）且随着临床分期增加表达量增加（P<0.05）,LINC00467高表达导致患者不良的总体生存率（OS,P=0.049）和第一阶段进展率（FP,P=0.026）。与shNC组相比，shlinc00467感染的A549和H1299细胞中LINC00467表达降低（P<0.001）。与shNC组相比，shlinc00467导致A549和H1299细胞克隆形成数（P<0.01）、迁移细胞数（P<0.001）、侵袭细胞数（P<0.001）减少、p-mTOR/mTOR(P<0.05)及p62(P<0.01)蛋白表达减少；p-AMPK/AMPK(P<0.05)和LC3II/I(P<0.05)增加；GSEA提示了LINC00467对自噬通路的抑制作用（|NES|>1,P<0.05,FDR<0.25）。结论 LINC00467能促进肺腺癌细胞增殖和转移，可能是通过抑制AMPK/mTOR信号通路介导的自噬实现的。

关键词

LINC00467 / 肺腺癌 / 自噬 / 增殖 / 转移 / AMPK/mTOR信号通路