异功散通过调控脑水液代谢改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力

摘要

目的 观察异功散对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响，并从调控脑水液代谢系统探讨异功散抗痴呆的作用机制。方法 将3月龄雄性APP/PS1转基因小鼠及同龄同背景野生型C57BL/6小鼠随机分为4组（8只/组）：对照组、模型组、多奈哌齐（1.67 mg/kg）组、异功散（7.5 g/kg）组。灌胃给予各组对应药物1次/d,1月后采用Morris水迷宫实验考察小鼠的学习记忆能力；HE染色观察海马皮层组织病理形态学变化；免疫组化染色、硫磺素S染色观察脑内淀粉样蛋白斑块数量变化；ELISA法检测脑组织和血清Aβ_1-40和Aβ_1-42含量；伊文思蓝法检测血脑屏障（BBB）通透性变化；免疫荧光共定位考察AQP4在星型胶质细胞上极化情况；Western blotting观察血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）、闭锁连接蛋白1（ZO-1）、闭合蛋白（Occludin）、β-淀粉样前体蛋白（APP）、β-分泌酶（BACE1）、胰岛素降解酶（IDE）、低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP1）、晚期糖基化终末产物受体（RAGE）、水通道蛋白4 （AQP4）蛋白表达情况。结果 与对照组比较，APP/PS1小鼠第5天的逃避潜伏期显著延长（P<0.001），平台象限停留时间降低（P<0.05）；海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量增加且病理评分升高（P<0.001）;Aβ阳性斑块明显升高以及硫磺素S荧光强度明显增强（P<0.05）；脑组织和血清Aβ_1-40、Aβ_1-42含量升高（P<0.05）;BBB通透性增加（P<0.01）,RAGE蛋白表达上调（P<0.01）而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达下调（P<0.05），且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量减少（P<0.05）。与模型组比较，异功散组小鼠第5天的逃避潜伏期缩短（P<0.001），平台象限停留时间增加（P<0.05）且平均游泳速度加快（P>0.05）；海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量减少且病理评分降低（P<0.01）;Aβ阳性斑块减少以及硫磺素S荧光强度减弱（P<0.05）；脑组织和血清Aβ_1-40、Aβ_1-42含量降低（P<0.05）；维持了BBB通透性（P<0.01）,RAGE蛋白表达下调（P<0.05），而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达上调（P<0.05），且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量明显增加（P<0.01）。结论 异功散能够通过改善APP/PS1小鼠脑内神经细胞损伤、Aβ病变，调控脑水液代谢系统相关蛋白表达而改善学习记忆变化。

关键词

异功散 / 痴呆症 / 脑水液代谢系统 / APP/PS1小鼠 / AQP4