HNRNPA1基因在结直肠癌组织中高表达及其潜在的诊断和治疗价值

摘要

目的 通过生物信息学和细胞实验探究HNRNP A1在结直肠癌中的临床意义及其在肿瘤组织中的表达情况。方法 使用HPA、TIMER和GEPIA数据库，分析HNRNP A1在结直肠癌组织中的表达水平，并检验HNRNP A1与Ki-67/VEGFA在结直肠癌中表达的相关性。使用Kaplan-Meier Plotter数据库评估HNRNP A1 mRNA水平与结直肠癌患者生存率之间的联系。通过基因富集途径分析，预测HNRNP A1在结直肠癌中的潜在生物学作用。通过免疫组织化学（IHC）和Western blotting技术检测HNRNP A1在结直肠癌及其癌旁组织中的蛋白表达。利用TIMER数据库网站对HNRNP A1在免疫浸润细胞中的表达进行预测。使用慢病毒敲低RKO/Caco2细胞中HNRNP A1的表达；通过CCK-8实验检测细胞增殖，使用克隆形成实验检测HNRNP A1对细胞增殖能力的影响；利用细胞划痕实验和Transwell迁移实验评估两组细胞（RKO/Caco2-nc、RKO/Caco2-sh）的迁移能力。最后验证HNRNP A1小分子抑制剂（VPC-80051）对肿瘤细胞增殖的影响。结果 在结直肠癌（CRC）肿瘤组织中HNRNP A1的表达显著上调并与患者的不良预后显著相关（P<0.01）。TIMER数据库的分析结果指出，HNRNP A1与肿瘤微环境中的免疫细胞之间存在一定的相关性。根据GEPIA数据库的分析，CRC组织中HNRNP A1、MKI67和VEGFA的表达均较高（P<0.05），且HNRNP A1与这两者之间存在正相关关系。通过Kaplan-Meier Plotter进行的生存分析表明，在CRC中，HNRNP A1的高表达预示着较差的总生存期（P=0.0081）和无进展生存期（P=0.012）。基因富集通路分析的数据显示，HNRNP A1可能参与到多个与CRC进展相关的生物途径中。HNRNP A1影响RKO/Caco2细胞的增殖和迁移能力，对照组（RKO/Caco2-nc）的增殖能力、克隆形成能力和迁移能力均优于实验组（RKO/Caco2-sh），差异有统计学意义（P<0.05）;HNRNP A1小分子抑制剂（VPC-80051）可以有效抑制结直肠癌增殖活性，并具有时间和浓度依赖性；IHC显示HNRNP A1在结直肠癌中高表达，且与肿瘤分期有密切关系（P<0.0001）。结论 HNRNP A1基因在CRC组织中表达较高，并可调节细胞的增殖和迁移能力，与不良预后密切相关，同时HNRNP A1小分子抑制剂（VPC-80051）也可以抑制结直肠癌细胞的增殖，因而可作为CRC治疗过程中新的潜在治疗靶点。

关键词

结直肠癌 / HNRNP A1 / 增殖与转移 / 预后 / 生物信息学