天麻素经PI3K/AKT通路改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后小胶质细胞介导的炎症反应

摘要

目的 探讨天麻素通过PI3K/AKT信号通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后活化小胶质细胞介导的炎症反应的作用机制。方法 将39只3日龄新生SD大鼠随机分为假手术组（sham,n=9）、缺氧缺血模型组（HIBD,n=15）、天麻素处理组（HIBD+G,n=15）。采用Western blotting检测HIBD后TNF-α、IL-1β、IL-10和TGF-β1蛋白的表达；网络药理学筛选天麻素治疗HIBD的潜在作用靶点；Western blotting检测HIBD和氧糖剥夺（OGD）诱导活化的小胶质细胞中PI3K/AKT信号通路的表达；CCK8检测PI3K/AKT通路特异性抑制剂LY294002对BV-2小胶质细胞的细胞毒性作用；RT-qPCR检测LY294002干预后天麻素对TNF-α和TGF-β1的mRNA水平的影响。结果 Western blotting显示，与HIBD组相比，天麻素降低缺血侧胼胝体区TNF-α和IL-1β的蛋白表达（P<0.05），促进IL-10和TGF-β1的蛋白表达（P<0.05）；网络药理学显示，PI3K/AKT信号通路显著富集，且天麻素与PI3K之间具有较好的结合能力；Western blotting显示，与HIBD组、OGD组相比，天麻素促进PI3K和AKT的磷酸化水平（P<0.05）;CCK8结果显示LY294002在0～120μmol/L浓度范围内对BV-2小胶质细胞没有细胞毒性作用；RT-qPCR结果显示，与对照组相比，OGD组TNF-α的mRNA水平升高，TGF-β1的mRNA水平降低（P<0.05）；天麻素干预后降低TNF-α的mRNA水平，升高TGF-β1的mRNA水平（P<0.05）;LY294002处理后TNF-α的mRNA水平进一步升高，TGF-β1的mRNA水平进一步降低（P<0.05）；而LY294002与天麻素联合用药后TNF-α和TGF-β1的mRNA水平无明显变化。结论 天麻素能抑制HIBD后活化小胶质细胞介导的炎症反应，其作用机制与PI3K/AKT信号通路有关。

关键词

缺氧缺血性脑损伤 / 天麻素 / 炎症反应 / 氧糖剥夺 / 小胶质细胞 / PI3K/AKT