MiR-6838-5p过表达下调DDR1基因表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖

摘要

目的 探索miR-6838-5p调控DDR1基因表达水平对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法 采用脂质体转染方法干预乳腺癌MCF-7细胞中miR-6838-5p及DDR1基因表达，设置组别如下：Control mimic;miR-6838-5p mimic;Control inhibitor;miR-6838-5p inhibitor;Control siRNA、DDR1 siRNA、Control vector、DDR1 vector及miR-6838-5p过表达+DDR1过表达共转染组。qRT-PCR实验检测miR-6838-5p在正常乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达；通过TargetscanV 8.0等软件预测miR-6838-5p可能作用的靶基因；双荧光素酶报告基因实验验证miR-6838-5p与DDR1存在靶向结合位点；CCK-8实验及EdU实验检测细胞增殖情况；Western blotting实验检测DDR1表达情况；通过裸鼠荷瘤实验验证miR-6838-5p通过调控DDR1表达抑制了乳腺癌MCF-7细胞增殖。结果 miR-6838-5p在乳腺癌细胞中表达量低于乳腺正常上皮细胞（P<0.05）；对比对照组，miR-6838-5p能抑制乳腺癌细胞增殖（P<0.05）；双荧光素酶报告基因实验证明miR-6838-5p可以靶向结合DDR1(P<0.01),Western blotting实验证明miR-6838-5p能调控DDR1基因表达；DDR1促进乳腺癌细胞的增殖（P<0.05）;miR-6838-5p过表达+DDR1过表达共转染后能回复miR-6838-5p对乳腺癌细胞增殖的抑制作用（P<0.05）；裸鼠荷瘤实验结果表明过表达miR-6838-5p后肿瘤体积明显减小，Western blotting结果表明肿瘤内miR-6838-5p过表达后抑制了DDR1的表达（P<0.05）。结论 miR-6838-5p通过调控DDR1基因表达抑制了乳腺癌细胞的增殖。

关键词

miR-6838-5p / 乳腺癌 / DDR1 / 细胞增殖