血根碱通过调控Nrf2/NF-κB通路缓解小鼠溃疡性结肠炎

摘要

目的 探讨血根碱（SA）对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）的作用机制。方法 随机将56只雄性C57BL/6小鼠分为空白对照组、模型组（DSS组）、SA低剂量组（DSS+SA-L,SA 1 mg/kg）、SA中剂量组（DSS+SA-M,SA 5 mg/kg）、SA高剂量组（DSS+SA-H,SA 10 mg/kg）、柳氮磺吡啶组（DSS+SASP,SASP 400 mg/kg）、SA高剂量组+Nrf2抑制剂ML385组（DSS+SAH+ML385,SA 10 mg/kg+ML385 30 mg/kg）,8只/组。除空白对照组外，均采用3.5%DSS诱导建立UC模型，SA干预组和柳氮磺吡啶组给与对应药物灌胃治疗，通路抑制剂组SA 10 mg/kg灌胃同时腹腔注射ML385 30 mg/kg。通过监测小鼠体质量变化、疾病活动指数（DAI）评分、结肠长度测量、HE染色评估小鼠炎症；检测结肠组织中活性氧（ROS）水平；比色法检测结肠组织中丙二醛含量（MDA）; RT-qPCR检测结肠组织中炎性因子；Western blotting法检测结肠组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap-1)、磷酸化p65蛋白（p-p65）、p65、紧密连接蛋白（occludin、ZO-1）蛋白表达。结果 与DSS组相比，SA治疗可缓解DSS组小鼠体质量下降、结肠长度缩短、DAI评分升高（P<0.05）。HE染色显示，DSS组结肠腺体结构破坏，SA可明显改善结肠隐窝结构。RT-qPCR显示，SA干预组结肠组织中TNF-α、IL-1β和IL-6水平下降（P<0.05）,ROS、MDA下降（P<0.05）。Western blotting结果显示，结肠组织中Nrf2、HO-1、occludin、ZO-1蛋白表达上升（P<0.05）,Keap-1、p-p65蛋白表达下降（P<0.05）,p65无明显变化（P>0.05），且DSS+SA-L、DSS+SA-M、DSS+SA-H组各指标变化呈剂量依赖性。Nrf2通路抑制剂ML385降低高剂量组SA对UC小鼠结肠黏膜的改善作用。结论 SA可改善UC样小鼠肠炎，作用机制可能与激活Nrf2通路，抑制Nrf2介导的NF-κB通路有关。

关键词

溃疡性结肠炎 / 血根碱 / Nrf2 / NF-κB