血根碱通过调控STUB1/GPX4诱导直肠癌细胞发生铁死亡

摘要

目的 探究血根碱（SAN）对结直肠癌细胞增殖及铁死亡的影响。方法 SW620和HCT-116细胞体外培养，在SW620细胞加入浓度分别为0、0.5、1、1.5、2、2.5、3μmol/L的SAN,HCT-116细胞加入0、0.5、0.75、1、1.25、1.5、1.75、2μmol/L的SAN。采用CCK8法检测检测细胞活力，并计算出IC₅₀；检测SAN对细胞的增殖抑制作用采用集落克隆实验；Transwell实验观测SAN对细胞侵袭迁移力的影响；ROS检测试剂盒通过流式细胞仪分析细胞ROS含量的变化；丙二醛（MDA）检测盒来检测脂质过氧化物的产生。氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽定量试剂盒测定谷胱甘肽（GSH）水平。Western blotting法检测铁死亡相关蛋白（STUB1、GPX4）的表达。结果 CCK8、集落克隆的结果显示，SAN可显著抑制SW620和HCT-116细胞增殖（P<0.05）;Transwell实验结果显示，SAN可抑制SW620和HCT-116细胞侵袭迁移能力（P<0.05）；流式细胞术检测显示：SAN显著促进SW620和HCT-116细胞内ROS的产生（P<0.05）;MDA检测结果显示，SAN可使SW620和HCT-116细胞内MDA含量增加（P<0.05）;GSH检测结果显示，SAN使SW620和HCT-116细胞内GSH下降（P<0.05）;Western blotting结果显示，SAN可通过调控STUB1下游蛋白GPX4的下调（P<0.05）。结论 SAN可通过调节STUB1/GPX4诱导结直肠癌细胞发生依赖性铁死亡，提供了新治疗结直肠癌的靶点以及实验依据。

关键词

血根碱 / 结直肠癌 / 铁死亡 / STUB1 / GPX4