三百棒通过调控PI3K/Akt信号通路改善胶原诱导性类风湿性关节炎大鼠的血管翳

摘要

目的 探讨三百棒醇提物（TAAE）通过PI3K/Akt信号通路改善胶原诱导性（CIA）大鼠血管翳的治疗作用及其机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、雷公藤多苷片组（TGT）、三百棒醇提物低剂量组（TAAE-L）、三百棒醇提物中剂量组（TAAE-M）、三百棒醇提物高剂量组（TAAE-H）,10只/组。除正常组外，对其余大鼠采用二次免疫法建立CIA大鼠模型。二次免疫结束后，三百棒醇提物组和雷公藤多苷组按相应剂量灌胃给药，1次/d，连续35 d。采用关节炎指数（AI）评分评估大鼠关节炎症程度；HE染色法观察膝关节滑膜病理变化；ELISA检测细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）的水平；Western blotting法检测各组大鼠滑膜组织中PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt、血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮抑制因子内皮抑素（ES）、缺氧诱导因子1-α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶（MMP1、MMP3、MMP9）蛋白含量的变化；RT-PCR检测各组大鼠滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、VEGF、HIF-1α、PI3K、Akt mRNA水平。结果 与模型组相比较，TAAE和TGT组大鼠的足肿胀度和AI评分降低（P<0.05），膝关节病理变化明显改善，新生血管生成减少，血清中炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）水平降低（P<0.01）。Western blotting实验结果显示，与模型组相比较，TAAE的干预上调ES蛋白水平，下调p-PI3K、p-Akt、MMP1、MMP3、MMP9、VEGF、HIF-1α蛋白水平，差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。TAAE还降低了TNF-α、IL-6、IL-1β、PI3K、Akt、VEGF、HIF-1α mRNA水平，差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。TAAE-H组与TGT组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 TAAE可通过PI3K/Akt信号通路调控HIF-1α、VEGF、ES、MMP1、MMP3、MMP9等蛋白的表达，改善CIA大鼠关节症状，抑制RA血管翳形成。

关键词

三百棒 / 类风湿性关节炎 / 血管翳 / 炎症 / PI3K/Akt信号通路