双氢青蒿素通过促进活性氧的产生增强鼻咽癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性

摘要

目的 探究双氢青蒿素（DHA）与顺铂（DDP）联合应用对耐DDP鼻咽癌细胞株HNE1/DDP增殖抑制和促凋亡的作用及其机制。方法 CCK-8法检测不同浓度DHA(0、5、10、20、40、80、160μmol/L)和不同浓度DDP(0、4、8、16、32、64、128μmol/L)处理24 h和48 h后HNE1/DDP细胞的存活率；采用Compusyn软件计算DHA与DDP的联合指数。将HNE1/DDP细胞分为对照组、DHA组、DDP组、DHA联合DDP组，给药处理24 h后，CCK-8、EdU和集落克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞增殖和集落克隆形成能力；流式细胞术检测细胞凋亡情况和细胞内活性氧（ROS）水平；Western blotting检测凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3表达水平。ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸预处理后，检测其对DHA联合DDP诱导的细胞增殖、凋亡的影响。结果 不同浓度DHA和不同浓度DDP均能明显抑制HNE1/DDP细胞活力，DHA(5μmol/L)联合DDP(8、16、32、64、128μmol/L)的联合指数均小于1。与DHA或DDP单独处理组相比，DHA联合DDP组细胞活力下降（P<0.01），集落形成数和EdU阳性染色细胞减少（P<0.01），细胞凋亡率和细胞内ROS水平升高（P<0.01），细胞凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3的表达水平增加（P<0.05），而N-乙酰半胱氨酸预处理可部分逆转DHA联合DDP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用（P<0.01）。结论 DHA增强DDP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用，其机制可能与细胞内ROS的积累有关。

关键词

鼻咽癌 / 双氢青蒿素 / 顺铂 / 活性氧 / 增殖 / 细胞凋亡