金盏花苷E通过自噬途径下调GPX4和SLC7A11抑制肝癌细胞的增殖和迁移

摘要

目的 探讨金盏花苷E抑制肝癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法 金盏花苷E处理肝癌细胞，CCK-8检测细胞活力；Western blotting检测GPX4、SLC7A11、LC3、P62的表达以及Akt/mTOR的磷酸化。自噬抑制剂LY294002和激活剂Rapamycin与金盏花苷E联合处理肝癌细胞，EdU和Transwell实验分别检测肝癌细胞的增殖和迁移能力。TCGA数据库分析GPX4和SLC7A11在肝癌及正常肝组织中的表达水平，以及与肝癌患者存活之间的关系。Western blotting和qPCR分别检测GPX4和SLC7A11在肝癌细胞和正常肝细胞中的表达水平。结果 金盏花苷E能够显著抑制肝癌细胞的存活（P<0.05）;GPX4和SLC7A11在肝癌组织和肝癌细胞中均显著高表达；GPX4和SLC7A11的表达与肝癌患者存活呈显著负相关（P<0.001）；金盏花苷E显著抑制GPX4和SLC7A11蛋白的表达，激活Akt-mTOR通路，增强LC3Ⅱ的表达（P<0.01）；自噬激活剂Rapamycin显著增强金盏花苷E对GPX4和SLC7A11的抑制作用，而自噬抑制剂LY294002则明显逆转了金盏花苷E对GPX4和SLC7A11的抑制作用（P<0.05）；抑制自噬途径能够逆转金盏花苷E对肝癌细胞增殖和迁移的抑制作用，增强自噬途径则发生相反的变化（P<0.01）。结论 金盏花苷E经自噬途径下调GPX4和SLC7A11抑制肝癌细胞的增殖和迁移。

关键词

金盏花苷E / 谷胱甘肽过氧化物酶4 / 溶质转运蛋白第7家族11成员 / 自噬 / 肝细胞癌