2,6-二甲氧基-1,4-苯醌通过抑制NLRP3炎症小体活化缓解小鼠的感染性休克

摘要

目的 探究发酵小麦胚芽提取物主要活性成分2,6-二甲氧基-1,4-苯醌（DMQ）抑制NLRP3炎症小体活化并缓解小鼠感染性休克的作用机制。方法 细胞学水平：在BMDM细胞中，经脂多糖（LPS）预处理、DMQ干预后，利用尼日利亚菌素（Nigericin）、ATP、尿酸钠结晶（MSU）分别活化经典NLRP3炎症小体以及胞内转染LPS活化非经典NLRP3炎症小体。利用聚脱氧腺苷酸（Poly A:T）活化AIM2炎症小体。在THP-1细胞中，利用Nigericin活化经典NLRP3炎症小体，通过Western blotting和ELISA方法测定NLRP3炎症小体活化产物的表达水平。蛋白分子水平：利用免疫共沉淀探究DMQ阻断NLRP3炎症小体活化的具体机制。动物水平：将8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组、感染性休克LPS组、DMQ 20 mg/kg治疗组、DMQ 40 mg/kg治疗组，6只/组，待DMQ治疗组小鼠预注射相应浓度DMQ后，对照组小鼠注射无菌PBS，其余3组小鼠腹腔注射相同剂量LPS，利用ELISA检测DMQ干预对LPS诱导的小鼠感染性休克模型中血清和腹腔灌洗液中TNF-α和IL-1β分泌水平的影响。DMQ预处理后注射LPS观察记录小鼠36 h内的生存状态并绘制生存曲线。结果 DMQ可有效抑制小鼠BMDM细胞和人THP-1细胞中经典NLRP3炎症小体活化（P<0.05），在小鼠BMDM细胞中对非经典NLRP3炎症小体活化也起到有效抑制作用（P<0.05）,DMQ对AIM2炎症小体活化无影响（P>0.05）。进一步实验结果揭示DMQ可阻断ASC和NLRP3之间的相互作用。DMQ治疗组可显著降低小鼠血清和腹腔液中IL-1β的分泌水平（P<0.05）并延长小鼠生存时间（P<0.05）。结论 发酵小麦胚芽提取物主要活性成分DMQ通过阻断ASC和NLRP3之间的相互作用有效抑制NLRP3炎症小体活化并缓解LPS诱导的小鼠感染性休克。

关键词

2,6-二甲氧基-1,4-苯醌 / NLRP3炎症小体 / 感染性休克 / 发酵小麦胚芽提取物