澳洲茄碱通过调控Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路促进非小细胞肺癌发生凋亡

摘要

目的 探讨龙葵活性成分澳洲茄碱对非小细胞肺癌细胞PC9增殖、凋亡的影响。方法 体外培养PC9细胞，设对照组（0μmol/L）及澳洲茄碱不同剂量组（0、2、5、10、15、20、25μmol/L）,CCK-8试剂盒检测澳洲茄碱对PC9细胞的增殖抑制作用；TMRE检测线粒膜电位；caspase3/7活性试剂盒联合GreenNuc?Caspase-3/Annexin V-mCherry染色检测caspase-3活性；Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率；给药处理或者使用PTEN抑制剂后，Western blot检测细胞中相关蛋白的表达量。结果 与对照组相比，经澳洲茄碱干预24、48、72 h后，PC9细胞的活力均明显降低（P<0.05）；经澳洲茄碱干预24 h后，细胞线粒体膜电位明显降低，而细胞凋亡比例明显升高（P<0.05）;caspase-3/7活力、活细胞Caspase-3活性及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高（P<0.01）;PI3K和Akt磷酸化水平降低（P<0.05）；而PTEN、Bax蛋白表达上调（P<0.05）；抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达下调（P<0.05）。结论 澳洲茄碱可通过调控Bcl-2/Bax/caspase-3通路及其上游蛋白活性而抑制PC9细胞增殖，促进其凋亡。

关键词

澳洲茄碱 / 肺癌 / Bcl-2/Bax/caspase-3通路 / 同源性磷酸酶-张力蛋白 / 细胞凋亡