大豆异黄酮通过抑制Wnt/Ca²⁺信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注引起的钙超载

摘要

目的 探讨大豆异黄酮（SI）减轻脑缺血再灌注（I/R）引起钙超载的作用机制。方法 将48只SD大鼠采用随机数法分为4组：假手术组（Sham组）、脑缺血再灌注模型组（I/R组）、病毒空载组（NC组）、Frizzled-2敲低组（Knock down组），12只/组。采用线栓法堵塞大脑中动脉2 h，再灌注24 h构建I/R模型。采用Western blot验证病毒敲低效率并检测Wnt/Ca²⁺信号通路相关蛋白Wnt5a、Frizzled-2和P-CaMKⅡ的变化。采用钙含量显色法检测各组缺血半暗带（IP）区钙离子浓度变化，HE检测各组IP区组织结构变化。另将72只SD大鼠采用随机数法分为3组：Sham组、I/R组、大豆异黄酮预处理组（SI组），24只/组。采用多普勒血流仪检测局部脑血流变化，TTC染色检测脑梗死体积，HE和尼氏染色检测IP区组织变化、免疫荧光检测ROS、Ca²⁺和细胞凋亡水平、流式检测细胞钙离子浓度，试剂盒检测血清MDA和SOD水平，Western blotting和免疫组化检测IP区Wnt5a、Frizzled-2和P-CaMKⅡ蛋白表达。结果 与I/R组比较，Knock down组钙离子浓度（P<0.001）、Wnt5a（P<0.05）、Frizzled-2（P<0.05）和P-CaMKⅡ（P<0.001）表达水平均降低；与I/R组比较，SI组钙离子浓度（P<0.05）、ROS和MDA水平（P<0.001）、细胞凋亡程度（P<0.001）、脑梗死体积（P<0.001）、Wnt5a、Frizzled-2和P-CaMKⅡ表达水平（P<0.05）均降低，SOD水平升高（P<0.001）。结论大豆异黄酮可能通过抑制Wnt/Ca²⁺信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注引起的钙超载

关键词

大豆异黄酮 / 脑缺血再灌注 / 钙超载 / Wnt/Ca²⁺