α2-巨球蛋白通过调控血管内皮细胞改善小鼠激素性股骨头坏死

摘要

目的 探讨α2-巨球蛋白（A2M）是否对激素性股骨头坏死（SANFH）具有保护作用。方法 体外实验：用梯度浓度（10-8～10-5mol/L）地塞米松（DEX）处理人脐静脉内皮细胞（HUVECs）建立糖皮质激素（GC）诱导内皮细胞损伤体外模型，设置对照组、DEX组、DEX+A2M(0.05 mg/mL)和DEX+A2M(0.1 mg/mL)4组，采用CCK-8法检测细胞活性，Transwell实验和划痕愈合实验检测HUVECs迁移，血管形成实验检测HUVECs血管形成能力，Western blot检测HUVECs中CD31和VEGF-A蛋白表达水平。体内实验：将24只BALB/c小鼠分为对照组、模型组（GC）和干预组（GC+A2M）,Micro-CT检测骨小梁情况，HE染色观察组织学特征，免疫组化染色检测CD31的表达。结果 与对照组相比，DEX处理后，HUVECs的活力下降，细胞迁移速度减慢，血管形成能力下降；并且DEX处理组细胞活性随着DEX浓度增加和刺激时间延长而降低（P<0.05）；加入A2M后，经DEX处理的HUVECs活性、细胞迁移能力和血管形成能力得以恢复，并和A2M的浓度成正相关（P<0.05）;Western blot结果显示，与对照组相比，DEX降低了HUVECs的CD31和VEGF-A蛋白表达水平，而A2M的介入使经DEX处理的HUVECs的CD31和VEGF-A蛋白表达水平得以恢复（P<0.05）。与对照组相比，GC组小鼠股骨头骨小梁明显破坏，破坏的骨小梁里充斥着大量空骨陷窝和肥大的脂肪细胞，CD31表达下降（P<0.05）；与GC组相比，GC+A2M组骨小梁的破坏较轻，大部分正常骨组织结构存在，并上调CD31的表达（P<0.05）。结论 A2M上调经DEX处理的HUVECs的增殖、迁移和血管形成A2M通过减轻股骨头内微循环损伤及维持微循环的稳定对激素性股骨头坏死起一定的保护作用。

关键词

2-巨球蛋白 / 激素性股骨头坏死 / 内皮功能障碍 / 血管内皮生长因子-A

基金资助

广东省基础与应用基础研究基金项目-区域联合项目（2022A1515140189）