黄蒲通窍胶囊改善Wilson病铜负荷大鼠的认知损害：基于抑制内质网应激介导的凋亡途径

摘要

目的 探究黄蒲通窍胶囊（HPTQ）对Wilson病（WD）铜负荷大鼠模型的神经保护作用及其可能的作用机制。方法 SD大鼠随机分为6组：对照组、模型组、黄蒲通窍胶囊低剂量组（HPTQ-L,0.47 g/kg）、黄蒲通窍胶囊中剂量组（HPTQ-M,1.41 g/kg）、黄蒲通窍胶囊高剂量组（HPTQ-H,4.23 g/kg）、青霉胺组（PCA,0.09 g/kg）,10只/组。通过含铜（1 g/kg）饲料、含铜（0.185%）水喂养12周构建WD铜负荷大鼠模型，铜离子（Cu）测定试剂盒检测肝铜、24 h尿铜水平；Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力；HE染色法观察海马组织CA1区神经元形态学改变；TUNEL染色观察海马组织CA1区神经元凋亡水平；免疫荧光法检测内质网应激（ERS）标志蛋白GRP78的表达情况；RT-qPCR和Western blot法检测GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平。结果 与对照组比较，模型组肝铜及24 h尿铜水平明显升高（P<0.01）；学习记忆能力明显减弱（P<0.01）;CA1区海马神经元出现损伤；TUNEL阳性神经元数量增多（P<0.01）;GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平升高（P<0.01）。与模型组比较，HPTQ各组及PCA组肝铜水平降低、24 h尿铜水平升高（P<0.01）；学习记忆能力改善（P<0.01,P<0.05）；海马神经元损伤减轻；TUNEL阳性神经元数量减少（P<0.01）;GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平降低（P<0.01,P<0.05）。结论 HPTQ对WD铜负荷大鼠模型具有神经保护作用，其机制可能与抑制ERS介导的凋亡途径有关。

关键词

Wilson病 / 黄蒲通窍胶囊 / 认知损害 / 内质网应激 / 凋亡

基金资助

国家自然科学基金（81874389）