健脾滋肾方抑制系统性红斑狼疮患者的足细胞自噬：基于网络药理学和临床研究

摘要

目的 基于网络药理学结合分子对接，通过临床验证，探讨健脾滋肾方从足细胞自噬途径治疗系统性红斑狼疮（SLE）潜在机制。方法 运用TCMSP、GeneCards、OMIM及TTD数据库获取健脾滋肾方及SLE、足细胞自噬相关靶点；取三者交集得到健脾滋肾方经足细胞自噬途径治疗SLE的潜在作用靶点。Cytoscape3.9.1构建“复方-成分-疾病-潜在靶点”网络及蛋白质互作网络，筛选出关键活性成分和靶点，进行分子对接。并临床纳入46例SLE患者和10例健康人，将SLE患者随机分为观察组（n=22）和对照组（n=21）。对照组口服醋酸泼尼松及吗替麦考酚酯，观察组在其基础上加用健脾滋肾方，疗程均为12周。运用ELISA检测SLE组及健康人群尿液中nephrin、synaptopodin水平；使用Western blot检测外周血内p-JAK1/JAK1、pSTAT1/STAT1、LC3II/LC3I、p62蛋白水平，并观察经健脾滋肾方干预后对SLE患者足细胞相关蛋白（nephrin、synaptopodin）、自噬水平（LC3II/LC3I、p62）及p-JAK1/JAK1、p-STAT1/STAT1表达影响。结果 经筛选得到健脾滋肾方经足细胞自噬途径治疗SLE的关键活性成分4种，核心靶点基因5个（STAT1、PIK3CG、MAPK1、PRKCA、CJA1）；富集分析显示可能涉及AGERAGE、JAK/STAT、EGFR、PI3K/Akt等信号通路。分子对接结果显示关键活性物质和核心靶点均有较好的结合活性。其中STAT1是结合活性最好的靶蛋白。临床试验证实健脾滋肾方能够显著降低血清中p-JAK1/JAK1及p-STAT1/STAT1、LC3II/LC3I蛋白表达水平（P<0.05或P<0.01），升高p62蛋白表达水平（P<0.05），降低尿液中nephrin、synaptopodin水平（P<0.05）。结论 健脾滋肾方经足细胞自噬治疗SLE具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点，其可能通过槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、异鼠李素等关键活性成分作用于STAT1靶基因，抑制JAK/STAT通路相关基因表达，调控自噬减轻SLE足细胞损伤。

关键词

系统性红斑狼疮 / 健脾滋肾方 / 网络药理学 / 足细胞 / 自噬

基金资助

国家自然科学基金（81473672）; 安徽省临床医学研究转化专项项目（202304295107020114）; 大健康研究院新安医学与中医药现代化研究所专项资金资助（2023CXMMTCM015）; 2022年度国家级中医优势专科建设项目-风湿病科；安徽省卫生健康科研项目重点项目（AHWJ2022a005）; 安徽省高校协同创新项目（GXXT-2021-085）；安徽省教育厅研究生创新创业实践项目（ahzyydx-tb83）