NDUFA13过表达可减轻CCl₄诱导的小鼠肝纤维化：基于抑制NLRP3活化

摘要

目的 探究NDUFA13蛋白在小鼠急性肝损伤和肝纤维化中的保护作用及可能机制。方法 小鼠分为正常组（n=18）、CCl4组（n=18）、CCl4+AAV-NC组（n=18）、CCl4+AAV-NDU13组（n=18）。采用腹腔注射CCl(42次/周）建立肝纤维化小鼠模型，连续给药3、5、7周后处死取材。病毒干预组小鼠则预先分别尾静脉注射AAV8-TBG-NC对照与AAV8-TBG-NDUFA13过表达病毒，7～10 d后再经CCl4进行肝纤维化诱导。通过HE染色、Masson染色观察CCl4致小鼠肝损伤及肝纤维化情况。Western blotting检测肝组织中NDUFA13、α-SMA蛋白表达水平。免疫荧光分析NDUFA13与炎症小体NLRP3、肿瘤坏死因子TNF-α与白介素IL-1β、肝星型细胞活化标志物α-SMA与胶原纤维CollagenⅢ的表达情况。结果 HE染色、Masson染色结果显示CCl4诱导小鼠肝组织肝小叶结构紊乱，肝细胞变性坏死，炎症细胞浸润且伴大量胶原纤维沉积（P<0.001）。Western blotting结果发现CCl4模型鼠肝脏NDUFA13蛋白表达水平相比正常对照组明显降低（P<0.001）；而NDUFA13蛋白过表达后，CCl4处理小鼠的肝脏炎症细胞聚集和纤维化均明显减少（P<0.001）。免疫荧光结果显示，NDUFA13蛋白过表达的CCl4诱导鼠肝组织中炎症小体NLRP3活化明显减弱（P<0.001），并伴随炎症因子TNF-α与IL-1β分泌显著减少（P<0.001），同时肝星状细胞活化（P<0.05）及其胶原形成均受到抑制（P<0.001）。结论 肝细胞线粒体NDUFA13蛋白过表达可通过抑制NLRP3炎症信号活化发挥抗纤维化作用。

关键词

NDUFA13过表达 / NLRP3 / 炎症因子 / 肝星状细胞 / 肝纤维化

基金资助

国家自然科学基金（32171119,32371173）; 儿童发育疾病研究教育部重点实验室基础研究一般项目（GBRP-202116）