FAK抑制剂PF-562271减轻老化血小板诱导的人脐静脉内皮细胞损伤

摘要

目的 探究FAK抑制剂对老化血小板诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用。方法 实验分为空白对照组、脂多糖（LPS）组、造模组（LPS+Plt）和FAK抑制剂PF-562271组（LPS+Plt+PF-562271）。通过Western blot和免疫荧光检测FAK、p FAK和PECAM-1的蛋白表达。流式细胞术检测HUVEC活性氧（ROS）含量。细胞通透性和跨内皮细胞电阻实验，检测HUVEC屏障功能的变化。RT-qPCR检测炎性因子mRNA表达，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞上清液中，炎性因子的分泌情况。免疫荧光检测加入ROS抑制剂维生素C(Vit.C)后，PECAM-1的表达。结果 脂多糖和老化血小板处理后，FAK、pFAK和PECAM-1的蛋白表达增高，加入PF-562271后，FAK、pFAK和PECAM-1的蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）。流式细胞术结果显示，脂多糖和老化血小板可促进ROS的释放，而加入PF-562271后，ROS释放减少（P<0.001）。脂多糖和老化血小板导致内皮细胞屏障受损，PF-562271可缓解内皮细胞屏障功能的损伤（P<0.01）。脂多糖和老化血小板促进内皮细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的表达，PF-562271可降低炎症因子的表达（P<0.05）。加入维生素C后，PECAM-1蛋白表达降低（P<0.01）。结论FAK抑制剂PF-562271可通过改善氧化应激水平和降低炎症反应，缓解脂多糖和老化血小板诱导的内皮细胞损伤。

关键词

TRALI / PF-562271 / FAK / PECAM-1 / 老化的血小板 / 人脐静脉内皮细胞

基金资助

国家自然科学基金（82104178）; 安徽省教育厅重点项目（KJ2021A0768）