竹节参总皂苷缓解CCl₄诱导的大鼠急性肝损伤：基于调控PI3K/Akt/NF-κB信号通路

摘要

目的 探讨土家族药用植物竹节参提取物总皂苷对CCl4致急性肝损伤的保护作用及潜在的药理学机制。方法 将6周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组（100 mg/kg）、竹节参总皂苷低、中、高（50、100、200 mg/kg）剂量组，各组8只，除空白组外，其余各组采用CCl4诱导大鼠急性肝损伤模型，处理组于造模中给予药物灌胃干预。比较各组大鼠的血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBil）和碱性磷酸酶（ALP）水平；HE染色观察肝组织病理学改变；免疫组化检测肝脏组织PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关分子的表达；酶联免疫法测定肝脏组织总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）水平；蛋白免疫印迹法检测肝脏组织PI3K-Akt和SIRT6-NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果网络药理学分析显示，竹节参总皂苷对急性肝损伤的有治疗作用，其关键的通路为PI3K/Akt等信号通路。血清学和酶联免疫学实验结果显示，与正常组相比，模型组大鼠血清和肝组织的AST、ALT、ALP、TBil和MDA明显增高（P<0.01）,T-SOD和GSHPx水平显著降低（P<0.01）；与模型组相比，各治疗组ALT、AST、ALP、TBIL和MDA水平显著降低（P<0.01）,T-SOD和GSH-Px水平显著升高（P<0.01）。免疫组化结果显示，正常组大鼠肝组织细胞内未见p-NF-κB表达阳性，与正常组相比，模型组中p-NF-κB阳性表达则明显增加，阳性细胞数增多（P<0.01）；与模型组比较，各治疗组阳性表达明显减少（P<0.01）。免疫印迹结果显示，相对于正常组，模型组PI3K、p-Akt蛋白的表达水平下降，p-NF-κB、TNF-α和IL-6蛋白的表达水平升高（P<0.05）；与模型组相比，各治疗组PI3K、p-Akt和SIRT6蛋白的表达水平显著升高，p-NF-κB p65、TNF-α和IL-6的蛋白的表达水平显著降低（P<0.05）。结论 竹节参总皂苷可以通过调节PI3K/Akt和NF-κB通路，有效减缓CCl4诱导的大鼠急性肝损伤，发挥其抗炎、抗氧化应激和保护肝损伤的作用。

关键词

急性肝损伤 / 竹节参总皂苷 / PI3K/Akt/NF-κB / 抗炎 / 抗氧化

基金资助

国家自然科学基金地区基金（32160141,81801979）; 湖北省自然科学基金（2022CFB173）;湖北省自然科学基金青年项目（2019CFB358）; 湖北省教育厅科研项目（B2022101）