茶多酚通过抑制NLRP3炎症小体改善脓毒症小鼠的急性肺损伤

摘要

目的 探讨茶多酚（TP）对NLRP3炎症小体的调控作用机制以及其对脓毒症相关急性肺损伤的治疗效用。方法将60只C57BL/6小鼠随机平均分为假手术组（单纯开腹探查盲肠后即关腹）、盲肠结扎穿孔组（开腹暴露并游离盲肠后行盲肠结扎与穿孔操作后关腹）以及盲肠结扎穿孔+TP治疗组（盲肠结扎穿孔前1周予TP灌胃），每组20只。建模完成后绘制生存曲线评估各组小鼠对脓毒症打击的耐受情况。测定各组小鼠肺湿/干质量比值、肺组织髓过氧化物酶（MPO）水平，并对肺组织进行HE染色和急性肺损伤评分，评估肺损伤程度。ELISA法测定肺组织内IL-1β、TNF-α及IL-6表达水平；蛋白免疫印迹实验检测肺组织内NLRP3、caspase-1 p10及ASC蛋白表达水平；免疫组化染色测定肺组织内MPO、caspase-8及NLRP3蛋白表达，评估各组小鼠肺内炎症情况。检测肺组织内MDA及H₂O₂以评估氧化应激水平；免疫荧光共染NLRP3和NOX4蛋白以探讨二者表达及共定位。结果TP治疗组小鼠术后72 h死亡率、小鼠肺湿/干质量比值、肺组织MPO水平以及急性肺损伤评分均较盲肠结扎穿孔组小鼠显著下降（P<0.05）;TP治疗组小鼠肺组织内IL-1β、TNF-α及IL-6、NLRP3、caspase-1 p10、ASC等蛋白表达水平亦较盲肠结扎穿孔组小鼠显著降低（P<0.05）；氧化应激相关检测结果提示，TP治疗组小鼠肺组织内MDA及H₂O₂水平较盲肠结扎穿孔组小鼠显著减低（P<0.05）；免疫荧光共染则提示TP治疗组小鼠NOX4蛋白与NLRP3蛋白在肺组织内的表达和共定位较盲肠结扎穿孔组小鼠减少。结论TP可通过抑制NLRP3炎症小体相关炎症改善盲肠结扎穿孔诱导的小鼠脓毒症肺损伤，且这一调控机制可能与其对肺组织内氧化应激相关蛋白NOX4的表达抑制相关。

关键词

茶多酚 / 脓毒症 / 急性肺损伤 / NLRP3炎症小体 / 氧化应激