过表达LncRNA MEG3通过促进铁死亡增强肝癌细胞对顺铂的化疗敏感性

摘要

目的 探讨过表达LncRNA MEG3对肝癌细胞HepG2和LM3增殖、迁移和顺铂化疗敏感性的影响及机制。方法 生物信息学在线网站分析MEG3在健康人群与肝细胞癌（HCC）患者的表达情况；将HepG2和LM3细胞各自分成2组，NC组：转染pcDNA3.1(+)空载体的细胞；MEG3-OE组：转染pcDNA3.1(+)-MEG3质粒的细胞。另外在检测活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）实验中，将上述两组细胞分别各自给予顺铂（DDP）或铁死亡抑制剂Fer-1处理，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测细胞中MEG3的表达；CCK8和划痕实验检测肝癌细胞的增殖和迁移；另外采用CCK8实验检测DDP对肝癌细胞的抑制率；活性氧荧光探针（DCFH-DA）检测肝癌细胞中ROS的表达，MDA试剂盒检测肝癌细胞中MDA的浓度；Western blotting实验检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白重链1(FTH1)的蛋白表达水平。结果 MEG3在肝癌细胞中的表达显著低于LO2细胞，与生物信息学分析结果一致（P<0.05）；与阴性对照组相比，MEG3-OE组肝癌细胞增殖迁移能力降低（P<0.05）、DDP的抑制率增高（P<0.05）、ROS水平升高、MDA表达水平升高（P<0.05）;MEG3-OE组肝癌细胞GPX4和FTH1蛋白表达均显著降低。结论 肝癌细胞中LncRNA-MEG3表达降低，过表达MEG3可抑制肝癌细胞增殖与迁移，增强DDP的化疗敏感性，其机制与促进肝癌细胞铁死亡有关。

关键词

肝细胞癌 / LncRNA MEG3 / 顺铂 / 化疗敏感性 / 铁死亡

基金资助

湖南省自然科学基金（2019JJ40398,2020JJ4768）; 长沙市2022年度指导性科技计划项目（kzd22002）