RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解

摘要

目的 探讨X连锁RNA结合基序蛋白（RBMX）对膀胱癌细胞（1376细胞和UC-3细胞）的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法 采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术，分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型（1376细胞和UC-3细胞）。采用RT-qPCR和Western blotting分别在m RNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功。通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力，同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响；随后，采用Western blotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1(M1型丙酮酸激酶)和PKM2(M2型丙酮酸激酶)的表达变化；最后，利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响。结果 RT-qPCR和Western blotting结果显示，过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组（P<0.05），敲低RBMX膀胱癌细胞的m RNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组（P<0.05）。过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭，敲低RBMX则作用相反。Western blotting实验结果显示，过表达RBMX使PKM1表达上升，PKM2表达下降，敲低RBMX则作用相反。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明，过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成（P<0.05），敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成（P<0.05）。结论 RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力，有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标。

关键词

X连锁RNA结合基序蛋白 / M2型丙酮酸激酶 / 膀胱癌 / PKM2 / 糖酵解